清热灵颗粒-连翘苷含量测定方法-HPLC-UV

 仪器    SPD - LC10A 型高效液相色谱仪，包括SPD - 10A 紫外可见检测器（日本岛津公司)；Oasis HLB C18 固相萃取小柱（美国Waters 公司，规格：3 mL

 色谱条件  　色谱柱：Dikma DiamonsiLTM C18（200 mm ×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈- 水（30∶70)；流速：1.0 mL/min，检测波长：230 nm；柱温：30 ℃

对照品溶液的制备    准确称取以五氧化二磷为干燥剂，减压干燥至恒重并研细的连翘苷对照品约10 mg，置于50 mL容量瓶中，加甲醇适量，超声处理使之溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.2 mg/mL的连翘苷对照品溶液。

供试品溶液的制备    取清热灵颗粒约1.0 g，准确称定，加甲醇20 mL，超声处理20 min，过滤，残渣以甲醇30 mL分次洗涤，连续3次，过滤，合并滤液，再置于水浴上蒸干。残渣再用水溶解，并定量移至25 mL容量瓶中，定容，过滤，混匀，弃去初滤液，取续滤液备用。准确量取续滤液2.5 mL，移入经事先活化过的SPE小柱上（依次加甲醇5 mL、水5 mL淋洗)，待液体以约为1滴/s的速度流出后，再依次用水5 mL、20 %甲醇溶液5 mL以1滴/s的流出速度过柱，弃去流出液，最后用50 %甲醇溶液洗脱吸附在柱上的连翘苷，洗脱体积至近5 mL，以50 %甲醇溶液定容（洗脱液收集于5 mL容量瓶中)，以0.45 μm的滤膜过滤，取续滤液即得。