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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:附子—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定方法—HPLC-UV-1中药质量控制方法/操作步骤
    

附子—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定方法—HPLC-UV-1

  
方法名称:
  附子—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定—HPLC-UV-1
应用范围:
  用于附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定
方法原理:
 本品粉末用10%水浸润,用乙醚超声提取,经液相色谱仪分离,在230nm处测定,按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilent1100 高效液相色谱仪(在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱、VWD 检测器)

色谱条件  Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:A (40mmol乙酸铵缓冲液)-B(乙腈),梯度洗脱:0~15min,33 %B,15~45 min,33%~50%B;流速:1.0mL·min-1,检测波长:230nm。
试样制备:
 

对照品溶液的制备 精密称取新乌头碱、乌头碱和次乌头碱对照品适量,加0.01%盐酸-甲醇制成每1mL含新乌头碱223μg、乌头碱79μg和次乌头碱209μg的混合溶液,作为对照品溶液。

供试品溶液的制备 取生附片粉末(过40目筛) 1g,精密称定,置锥形瓶中,加10%氨水1mL浸润,再精密加入乙醚25mL,超声提取30min,吸取上清液,残渣用乙醚洗涤3次,每次5mL,合并提取与洗涤的乙醚液,50℃水浴挥干乙醚,用0.01%盐酸-甲醇10mL溶解,过0.45μm滤膜,取续滤液作为生品供试液。取附子各种炮制品粉末(过40目筛) 2g,精密称定,置锥形瓶中,加10%氨水2mL浸润,再精密加入乙醚50mL,超声提取30min,吸取上清液,残渣用乙醚洗涤3次,每次10mL,合并提取与洗涤的乙醚液,50℃水浴挥干乙醚,用0.01 %盐酸-甲醇2mL溶解,过0.45μm 滤膜,取续滤液作为炮制品供试液。
操作步骤:
  分别精密量取对照品溶液和各供试品溶液20μL,注入液相色谱仪,在上述色谱条件下,测定峰面积,按外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  刘芳,于向红,李飞等. HPLC测定附子及其炮制品中3种双酯型生物碱的含量.中国中药杂志.2006,14(31):1160~1162
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