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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:附子及其炮制品—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定方法—HPLC-D中药质量控制方法/操作步骤
    

附子及其炮制品—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定方法—HPLC-D

  
方法名称:
  附子及其炮制品—乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于附子中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量测定
方法原理:
 本品用浓水浸润,再用乙醚超声提取,经液相色谱仪分离,在240nm处测定,按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备    Aglient1100高效液相色谱仪;G1315B DAD检测器。

色谱条件   色谱柱:Hpersile BDSC18(150mm×4.6mm,5μm);流动相:40mmol/l乙酸铵洗脱(浓氨水调pH10.0)(A)-乙腈(B)梯度洗脱,分析时间50min,0~45minA:B从85%:15%~40%:60%,45~50min保持在40%A;流速:1.0ml/min;检测波长:240nm;柱温:30℃;进样量:10μl。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  分别精密称取乌头碱、新乌头碱和次乌头碱对照品2.32mg2. 16mg2.14mg置于同一10ml量瓶中,用0.05%盐酸甲醇溶液溶解并定容至刻度,摇匀,即得对照品储备液。

供试品溶液的制备   取不同产地生附子及炮制品适量,粉碎,过60目筛,分别取生附子粉末0.5g炮制品2g,精密称定,置150ml具塞锥形瓶中,浓氨水2ml,湿润0.5h,再加人乙醚75ml,密塞,放置过夜,超声提取10min,滤纸过滤,再以25ml乙醚分次洗涤药渣,过滤,合并滤液和洗液,40℃水浴挥干,0.05%盐酸甲醇溶液溶解残渣,并定容至5ml,摇匀,临用前用0.45μm林微孔滤膜滤过,作为样品溶液。
操作步骤:
  在选定的色谱条件下,分别吸取混合对照品溶液B和供试品溶液10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图,测定峰面积,按外标法计算各组分的含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  王瑞,孙毅坤,王耘等. 高效液相色谱法测定附子及其炮制品中三种双醋型生物碱.现代生物医学进展.2007,7(7):1078~1080
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