甘草浸膏—甘草酸的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定甘草浸膏中甘草酸的含量。

本方法适用于生药与制剂的分析。

取甘草浸膏研细，置50mL容量瓶中，加流动相超声提取，放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外检测器检测甘草酸的吸收值，计算出其含量。

1.冰醋酸

2.甲醇（色谱纯)

3.醋酸铵

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

C₁₈柱（250×4.6mm )。

2 色谱条件

2.1 流动相：0.2mol/L醋酸铵溶液 冰醋酸溶液 甲醇=33 1 67

2.3柱温：28℃

2.4 流速：1.0mL/min

2.5检测波长：250nm

1. 对照品溶液的制备

精密称取甘草酸铵对照品20.9mg，置50ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，得含甘草酸铵411.73μg/ml溶液（相当于甘草酸403.3μg/ml)，作为对照品储备液。

5.3 标准溶液的制备

分别精密吸取1、2、3、5、8ml于10ml容量瓶中，以流动相稀释至刻度，摇匀，得使成含甘草酸40.33、80.66、120.99、201.65、322.64、4.033μg/ml的浓度的对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取甘草浸膏研细，精密称取粉末约0.1g，置50ml容量瓶中，加流动相约40ml，超声20min，取出，放冷，加流动相至刻度，摇匀，滤过，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线的绘制

分别吸取各浓度溶液10μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以甘草酸量（μg)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线。的制备取续滤液，精密量取10μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以外标法计算含量。

6.2 供试品的测定

精密量取10ul 注入高效液相色谱仪，测定峰面积。以外标法计算含量。用紫外检测器测定甘草酸的吸收度，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定甘草酸的吸收度，计算出其含量。

王紫秋，雷凯琴，包冬香，HPLC法测定甘草浸膏中甘草酸的含量，浙江化工，2002，33（2)：20-21