方法名称： |
明目地黄丸－熊果酸的测定－薄层扫描法 |
应用范围： |
本方法采用薄层扫描法测定明目地黄丸中熊果酸的含量。 本方法适用于中成药明目地黄丸。 |
方法原理： |
供试品经提取，点样，展开，用薄层扫描仪进行双波长反射法锯齿扫描， λＳ=541nm，λＲ=700nm测量熊果酸吸收度积分值，计算其含量。 |
试剂： |
1. 氯仿 2. 石油醚 3. 醋酸乙酯 4. 冰醋酸 5. 乙醇 6. 环已烷 7. 硫酸 8. 乙醚 9. 熊果酸对照品(中国药品生物制品检定所) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 薄层扫描仪 1.2点样器 定量毛细管，一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.3展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。 1.4吸附剂 硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。 2 实验条件 2.1薄层板：以0.5%羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板，厚度0.5mm。 2.2展开剂：环已烷＋氯仿＋醋酸乙酯＋冰醋酸＝20＋5＋8＋0.5。 2.3 展开距离： 8cm。 2.4 定位：10%硫酸乙醇溶液显色确定斑点位置。 2.5 扫描方式：反射锯齿扫描，Sx=3，狭缝0.4mm×0.4mm。 2.6 扫描波长：测定波长540nm，参比波长700nm。 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 取熊果酸对照品，精密称定，加无水乙醇制成每ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 取供试品小蜜丸或大蜜丸18g，或水蜜丸10g，阴性对照品18g精密称定，加水50mL，放置使溶散，滤过药渣再用水80mL洗涤，在室温干燥至呈松软的粉末状，在100℃烘干，连同滤纸一并置索氏提取器内，加乙醚适量，加热回流提取4h，提取液回收乙醚至干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，20mL/次(浸泡约2min)倾去石油醚，残渣加适量无水乙醇-氯仿(3∶2)混合液，微热使溶解，定量移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液和阴性对照品溶液。 |
操作步骤： |
1. 标准曲线的建立 精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10μL，点于维素钠为粘合剂薄层板上，按上述条件展开，晾干，显色，扫描，以熊果酸的量(μg)对峰面积求得回归方程Y=19385.4X-178，r=0.9997；线性范围为1.02～5.10μg。 2.供试品含量测定 精密吸取供试品溶液5μL，对照品溶液2μL与5μL，分别交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂硅胶G薄层板上按上述条件展开，显色后扫描测定，计算其含量。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
参考文献： |
孙晓菊，胡军林，双波长薄层扫描法测定明目地黄丸中熊果酸的含量，时珍国医国药，2001，12（12)：1078～1079。 |
