方法名称： |
万氏牛黄清心丸-栀子苷-高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定万氏牛黄清心丸中栀子苷的含量。 本方法适用于中成药万氏牛黄清心丸。 |
方法原理： |
供试品加甲醇超声，滤过，用高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长238nm处检测栀子苷的吸收值，计算其含量。 |
试剂： |
1. 甲醇（色谱纯) 2. 乙腈（色谱纯) 3.水为重蒸水 4.栀子苷对照品(中国药品生物制品检定所) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂，Kromasil C18(250×4.6mm，5um)，理论板数按栀子苷计应符合规定。 1.3可变波长紫外检测器 1.4 色谱工作站 1.5 超声发生器 2 色谱条件 2.1 流动相：甲醇＋乙腈＝10＋90 2.2流速：1.0ml/min 2.3检测波长：238nm 2.4 柱温：室温 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 取栀子苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每毫升含0.298mg的溶液，即得对照品溶液。精密量取栀子苷对照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5ml，分别置于5ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。 2. 供试品溶液的制备 取本品10g，研细，过20目筛，精密称取约1.2g，置于50mL具塞锥形瓶中，加甲醇25mL，密塞，称定重量。超声处理20min，放冷至室温，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀。精密量取溶液10mL分别置于25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
1. 标准曲线的制备 精密吸取20ul，注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样量X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为：ｙ=494747X-1511.3，r=0. 9997(n=5)，线性范围为0.596-2.980mg。 2. 供试品的测定 精密吸取供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪测定峰面积，外标法计算栀子苷的含量。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
参考文献： |
卢兴红，张兰桐，反相高效液相色谱法测定栀子及其制剂中栀子苷的含量，中国药房，2003，14(12)：748～750。 |
