公开(公告)号 | CN1621415A |
公开(公告)日 | 2005.06.01 |
申请(专利)号 | CN200310113790.6 |
申请日期 | 2003.11.25 |
专利名称 | 一种抗SARS-CoV免疫球蛋白抗体及其制备方法 |
主分类号 | C07K16/10 |
分类号 | C07K16/10;A61K39/395;A61K9/12;A61K9/08;A61K9/10;A61P31/14;A61P11/00 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 |
发明(设计)人 | 王希良;杜新安;石辛甫;张松乐;刘建源;李岩;赵光宇;田光;周华 |
地址 | 100071北京市丰台区东大街20号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京太兆天元知识产权代理有限责任公司 |
代理人 | 张韬 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种用于治疗、预防及诊断SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白抗体,其特征在于该抗体是的制备方法包括如下步骤:1)灭活纯化SARS-CoV加入不完全福氏佐剂乳化制备免疫原,采用皮下、肌肉、腹股沟淋巴结多点免疫经检疫符合生物制品要求的马匹,免疫四次、间隔10天免疫一次,试血测抗体效价对流电泳1∶128、间接酶联免疫1∶12800,测抗体中和效价细胞病变法1∶12800、空斑减数法1∶12800,并不同SARS-CoV标准株免疫马产生的中和抗体均与其它SARS-CoV毒株呈现一致的中和抗体活性;2)采集马抗SARS-CoV血浆,用无热源2倍蒸馏水稀释加入21%饱和度硫酸铵混匀、离心弃沉淀纤维蛋白和白蛋白,上清再加入9%饱和度硫酸铵混匀离心要沉淀免疫球蛋白G,用无热源蒸馏水恢复原体积再用30%饱和度硫酸铵混匀、离心要沉淀IgG,先加入一定量的无热源蒸馏水、后加入无热源0.9%氯化钠盐水用6万超滤器超滤除盐、浓缩和去杂蛋白,超滤液为纯化马抗SARS-CoVIgG;3)纯化的马抗SARS-CoVIgG用盐酸调PH至3.2后胃蛋白酶切割,再用氢氧化钠调PH至7.4,加热58℃、30min,用帆布过滤去Fc段,滤液为初步纯化马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗体;4)初步纯化的马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗体过苯基蔬水层析,用200mmol/LpH7.0磷酸缓冲液、1mol/L硫酸铵上柱,20mmol/LpH7.0磷酸缓冲液收集F(ab′)2抗体流出液,再用6万超滤器超滤除盐、浓缩,为纯化马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗体。 |
摘要 | 本发明涉及一种用于治疗、预防及诊断SARS-CoV的抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗体,特征在于该抗体为马抗SARS-CoV免疫球蛋白F(ab′)2抗体,同时本发明公开该抗体的制备方法。本发明抗体能特异消灭SARS-CoV,对非典型肺炎的治疗和预防有很好的效果。 |
国际公布 |