方法名称： |
黄柏-小檗碱的含量测定-HPLC-UV5 |
应用范围： |
用于黄柏中小檗碱的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加甲醇超声提取，经液相色谱分离，在345nm处测定峰面积，外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 10A-VP 高效液相色谱仪：LC-10A Tvp 泵；SPD-M10Avp 二极管阵列检测器(日本岛津公司)；CLASS-VP 色谱工作站(日本岛津公司)。 色谱条件 色谱柱：Hypersil BDS C18 (150mm×416mm，5μm)；美国THERMO 有限公司)；流动相：乙腈-33mmol/L磷酸二氢钾溶液-三乙胺(20∶72∶0.1，用磷酸调pH值为4.50)；检测波长：345nm；柱温：25℃；流速：1.0ml/min。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 准确称取盐酸小檗碱对照810mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 准确称定黄柏药材粉末0.5g，置于25ml容量瓶中，加甲醇25ml，超声处理30min，放至室温，加甲醇至刻度，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得；测定样品溶液的制备：按原处方中各味药的比例，准确称取黄柏2g、甘草2g、桑寄生2g，按以下各组方案进行配比试验：黄柏单煎(Ⅰ)，黄柏与甘草(Ⅱ)，黄柏与桑寄生(Ⅲ)，黄柏与甘草、桑寄生(Ⅳ)，甘草与桑寄生(Ⅴ)，即分别加10倍量水煎煮2 次，每次1.5h，合并煎液，浓缩，水浴蒸干，用甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，稀释至刻度，精密吸取2ml，用5g碱性氧化铝吸附，装柱，并用50ml甲醇洗脱，收集洗脱液，水浴蒸干，再用甲醇溶解转移至10ml容量瓶，定容，用微孔滤膜(0.45μm) 滤过，取续滤液，即得。 |
操作步骤： |
在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各5μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
李巧如，张鹏，陈世虎等. 黄柏与甘草及桑寄生共煎对小檗碱提取率影响的研究. 中国药房. 2005，16(3)：235～236 |
