方法名称： |
黄柏及其颗粒剂—小檗碱及巴马汀的含量测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于黄柏及其颗粒剂中小檗碱及巴马汀的含量测定 |
方法原理： |
本品细粉加盐酸甲醇超声提取，经液相色谱分离，在345nm处测定峰面积，外标法计算含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 DIONEX 高效液相色谱仪：P680 Pump泵；PDA2100二极管阵列紫外检测器；DIONEX Chromeleon 工作站。 色谱条件 色谱柱：汉邦Lichrosp her C18 柱(4. 6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈：25mmol/ L磷酸二氢钠∶25mmol/ L十二烷基硫酸钠(2∶1∶1)；流速：1.0 ml/ min；检测波长：345nm：柱温：25℃。 |
试样制备： |
对照品溶液的制备 精密称取小檗碱和巴马汀各对照品10.0mg，分别加甲醇溶解并定容至25ml，制成400μg/ml 储备液。分别精密吸取小檗碱和巴马汀储备液各0.5 ml 和0.25 ml，加甲醇溶解并定容至10ml，制成1ml含20μg小檗碱和10μg巴马汀的对照品混合溶液。 供试品溶液的制备 黄柏药材样品溶液的制备：精密称取黄柏药材粉末约0.04g(过40目筛)置具塞锥形瓶中，精密加入50ml盐酸甲醇溶液(1∶100)；密塞并称重，冷浸15min后，超声30min，放冷至室温后，补足溶液至恒重，摇匀，常压过滤，弃去初滤液，续滤液经0.45μm 滤膜过滤，即得；黄柏颗粒剂样品溶液的制备：取黄柏颗粒剂约0.10g，精密称定，加适量盐酸甲醇溶液(1∶100)溶解，超声10min，放冷至室温后，定容至50ml，摇匀，常压过滤，弃去初滤液，续滤液经0.45μm滤膜过滤，即得。 |
操作步骤： |
在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各10μl进样，测定峰面积值，按外标法计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
王敏，李翔，王洪等. 反相离子对高效液相色谱法测定黄柏及其颗粒剂中小檗碱及巴马汀的含量. 第二军医大学学报. 2005，26(2)：195～197 |
