牛膝—胡萝卜甙的含量测定方法—HPLC

仪器   Jascopu-908高效液相色谱输液泵和Jasco PU-975紫外-可见检测器（日本分光公司)CKChrom色谱工作站（Scientiflc System Inc)，3550酶标仪（Bio-Rad)，1H- NMR BrukerAARX-300（300MHz)（日本产)

色谱条件   色谱柱：APEXODS柱（250 mm×4.6 mm，5μm，JONES Chromatography)；流动相：水-乙腈（70∶30)；流速：1.0 mL/min；检测波长：203 nm；柱温：30℃；进样量：20 μL

对照品溶液制备    精密称取胡萝卜甙适量，以甲醇-氯仿（1∶1)溶液并稀释制成0.2 mg/mL的溶液。内标溶液的配制：精密量取非那西汀对照品适量，用甲醇溶液并稀释成0.8 mg/mL。

供试品溶液制备   精密称取牛膝粉末（40目筛)1 g，置烧瓶中，以75 %乙醇回流提取3次（每次10 mL)，将提取液减压浓缩得醇浸膏，将浸膏溶于水10 mL混旋，混旋液转移至分液漏斗中，以乙酸乙脂萃取3次（每次10 mL)，合并萃取液，回收溶剂，以甲醇—氯仿（1∶1)转入10 mL量瓶中，再从量瓶中取出1 mL溶液置于另一10 mL量瓶中，精密加入内标溶液非那西汀1 mL，以甲醇-氯仿（1∶1)稀释置刻度，摇匀，微孔滤膜（0.45 μm)滤过，取续滤液即得供试品溶液。