一清片—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定一清片中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于大黄、黄连和黄芩组成的片剂。

本方法为高效液相色谱法，紫外吸收检测器于波长350nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，外标法计算含量。本法操作简便、精密度高、分离效果良好。

1.乙腈（色谱纯)

2.硝酸铵（分析纯)

3. 盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所,713 9204)

4. 一清片为市售品

1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Inertsil ODS C18色谱柱(5μm ,150mm×416 mm), 柱温30℃,进样量10μl。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈:0.4 mol·L^-1NH₄NO₃溶液(35∶65).

2.2 检测波长：350nm。

1. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品适量,加流动相制成36μｇ·ｍl^-1的对照品溶液。

2.供试品溶液的制备

本品20片,精密称定,研细,取约0.1g,精密称定,置100ml 量瓶中,加含0.5%盐酸的甲醇溶液50ml,超声处理30min ,冷却至室温,加含0.5%盐酸的甲醇溶液稀释至刻度,摇匀;取此液离心10min (1000r·min-1) ,分取上清液,作为供试品溶液。按处方比例同法制得缺黄连阴性空白溶液。

1. 标准曲线的绘制

取上述各对照品溶液2, 4, 6, 8, 10μl,依次进样,记录色谱图。以进样量对峰面积进行回归得标准曲线方程。

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长350nm处测定吸收值，计算出其含量。

向旭明,王旭东.HPLC 测定一清片中的盐酸小檗碱.华西药学杂志,2002 ,17(4) :293-294