新清宁片—大黄酚的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定新清宁片中大黄酚的含量。

本方法适用于由熟大黄等几味中药制成的新清宁片。

供试品置100mL磨口具塞三角瓶中，精密加入甲醇50mL，冷浸24h，过滤，精密吸取上述滤液10mL，置50mL具塞试管中，于水浴上蒸干甲醇，加水5mL，冰浴冷却后，加乙醚20mL，盐酸0.5mL，密闭振摇5min，精密量取上层乙醚液10mL，置另一具塞试管中，温水中蒸干乙醚，再加入甲醇5mL使残渣溶解，用微孔滤膜（0.45μm)过滤，精密吸取续滤液10μL，注入高效液相色谱仪，用紫外检测器检测大黄酚的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 乙醚（分析纯)

3. 大黄酚（购自中国药品生物制品检定所)

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Discovery C₁₈柱（250mm×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水=80 20（含0.1%的高氯酸)

2.2 柱温：室温

2.3 检测波长：254 nm

2.4 流速：1.0mL/min

1. 称取供试品

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细（过65目筛)，精密称取药粉0.5g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取大黄酚对照品适量，用甲醇溶解制成浓度为0.05mg/ml，作为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品置100mL磨口具塞三角瓶中,，精密加入甲醇50mL，冷浸24h，过滤，精密吸取上述滤液10mL，置50mL具塞试管中，于水浴上蒸干甲醇，加水5mL，冰浴冷却后，加乙醚20mL，盐酸0.5mL，密闭振摇5min，精密量取上层乙醚液10mL，置另一具塞试管中，温水中蒸干乙醚，再加入甲醇5mL使残渣溶解，用微孔滤膜（0.45μm)过滤，取续滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线的绘制

分别精密吸取上述对照液2 、4 、6 、8、10、20μl进样，用紫外检测器测定大黄酚的吸收度值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

.2 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定大黄酚的吸收度值，计算出其含量。

周宝宽，张其婉 . HPLC 测定莫家清宁丸中大黄酚的含量. 中药新药与临床药理，2000，11(5):301-303.