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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:西藏红豆杉叶—紫杉醇的含量测定方法—HPLC-DAD中药质量控制方法/操作步骤
    

西藏红豆杉叶—紫杉醇的含量测定方法—HPLC-DAD

  
方法名称:
  西藏红豆杉叶紫杉醇的含量测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于西藏红豆杉叶中紫杉醇的含量测定
方法原理:
 本品用甲醇超声提取,过化铝柱,经液相色谱仪分离,在227nm处测定,按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilent1100高效液相色谱仪;DAD检测器;Agilent1100色谱工作站。

色谱条件  色谱柱:Kromasil-C18 (250mm×4.6mm,5 μm)柱;流动相:甲醇-水 (65∶35) ;流量:0.8ml/min;检测波长:227nm;柱温:35 ℃。
试样制备:
 

对照品溶液的制备  准确称取对照品紫杉醇1.0mg,置于1.0mL容量瓶中,以甲醇溶解并定容,配制成相应浓度的对照品储备液,使用时用甲醇稀释成浓度0.01mg/ml,作为对照品溶液。。

供试品溶液的制备 准确称取粉碎至80目的样品5g,,加入甲醇20mL,超声提取1h,抽滤,以甲醇洗涤滤渣2次,每次1mL.滤渣重复上述操作,所得滤液与前一次滤液合并,回收大部分溶剂后,与2g中性氧化铝吸附混合,干燥1小时装入预先装填好的中性氧化铝(10g)小柱上,用氯仿100%淋洗至流出液无色,然后用三氯甲烷-甲醇(100:5)洗脱至绿色带至柱底层止,温水浴挥干,残渣用甲醇溶解并定容至2mL,即得供试品溶液。
操作步骤:
  精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,依上述色谱条件测定,按外标法计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  吴江,卢永昌,朱小军.固相萃取-反相高效液相色谱法测定西藏红豆杉叶中紫杉醇的含量.青海师范大学学报(自然科学版).2006,(3):71~73
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