方法名称： |
曼地亚红豆杉枝叶—紫杉醇的含量测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇的含量测定 |
方法原理： |
本品粉末用超声提取、浓缩、萃取等一系列处理后，经液相色谱仪分离，在227nm处测定，按外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
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仪器设备 BT8100型泵；K-2501型紫外检测器；N 2000双通道色谱工作站。 | 色谱条件 色谱柱：phenomenex C18 ( 250mm×4.60mm，5μm)；流动相：甲醇-水 (65∶35) ；流速：0.7mL /min；检测波长：227nm；柱温：25℃。 |
试样制备： |
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对照品溶液的制备 精密称取紫杉醇对照品5.1mg，以甲醇溶解并定溶于10mL容量瓶中，制成5.0μg/mL的紫杉醇对照品储备液。分别吸取 0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.00mL对照品储备液，以甲醇定溶于5mL容量瓶中，制成浓度分别为10.2，20.4，40.8，61.2，81.6，102μg/mL的标准液，供绘制标准曲线时使用。 | 供试品溶液的制备 精密称取 5.0000g曼地亚红豆杉干枝叶粉末，加入100mL无水乙醇，冷浸过夜，超声处理40min，静置过滤，滤渣再以100 mL无水乙醇超声30min，静置过滤，合并滤液，于45℃ 真空浓缩至 18mL左右，加入2mL蒸馏水，以50mL正己烷萃取，再以25mL正己烷萃取2次。乙醇相于45℃真空浓缩至无醇，浓缩物以50mL氯仿充分溶解，加入50mL1 mol /L碳酸钾溶液 (含5%氯化钠 )搅拌20min，静置分层，氯仿相再以25mL该碳酸钾溶液洗涤2次。氯仿相转移至50mL容量瓶，并以氯仿定容，作供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照品溶液和供试品溶液各6μL，注入液相色谱仪，依上述色谱条件测定，按外标法计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
王志刚，周春山，颜家良等.HPLC 法测定曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇的含量.应用化工.2007，36（1)：84～86 |
