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表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的酵母重组株及rhGM-CSF的纯化方法

公开(公告)号 CN1487086A  
公开(公告)日 2004.04.07  
申请(专利)号 CN03137202.3  
申请日期 2003.05.26  
专利名称 表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的酵母重组株及rhGM-CSF的纯化方法  
主分类号 C12N15/63  
分类号 C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/12;C12N15/27;C12P21/02;C07K14/535;C07K1/36;//(C12N1/19,C12R1∶84)  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 海南国栋药物研究所  
发明(设计)人 梁国栋;周鹏;夏中宁;蒲广西  
地址 571101海南省海口城西仁里坡华南热带农业大学海口校区教学综合楼7层  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 海南;66  
主权项 一种表达重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分泌型表达载体,其特征在于,该载体含有:重组的rhGM-CSF序列,其被插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游位点,删除Kex2(Lys-Arg)位点之后的Ste13位点(Glu-Ala-Glu-Ala)和启始密码子ATG,构建成rhGM-CSF分泌型表达载体。  
摘要 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的分泌型表达载体和一种简易纯化方法,用该分泌型表达载体转化的宿主细胞,以及用上述表达载体的毕赤氏酵母重组工程菌株发酵表达rhGM-CSF的方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统,目标蛋白rhGM-CSF不需要复性,其生物比活性可达到3.4×107单位/毫克蛋白,低毒副作用;因此,本发明的方法制得的rhGM-CSF不仅产率高,而且纯化工艺简便、成本低、产品毒副作用低。  
国际公布  
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