金水宝片－腺苷的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定金水宝片中腺苷的含量。

本方法适用于中成药金水宝片。

本品加稀乙醇超声处理，放冷，用流动相补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长260nm处检测腺苷的吸收值，计算出其含量。

1. 稀乙醇

2. 含2%四氢呋喃的磷酸缓冲溶液[0.066mol/L磷酸氢二钾溶液-0.066mol/L磷酸氢二钠溶液（2：3)]

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按腺苷计算应不低于2500。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：含2%四氢呋喃的磷酸缓冲溶液[0.066mol/L磷酸氢二钾溶液-0.066mol/L磷酸氢二钠溶液（2：3)]

2.2检测波长：260nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取本品20片，除去包衣，研细，取约1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取在105℃减压干燥至恒重的腺苷对照品10mg，置25 mL量瓶中，用稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2 mL，置100 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含腺苷8mg溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品20片，除去包衣，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇20mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液1 mL（剩余的续滤液备用)，置10 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长260nm处测定腺苷（C₁₀H₁₃N₅O₄)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p495。