三黄片—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于由大黄、盐酸小檗碱和黄芩浸膏等组成的片剂。

三黄片由大黄、黄芩浸膏和盐酸小檗碱组成,是一种具有清热泻火、消炎利便功效的常用中成药。收载于《中国药典》2000年版一部。其中盐酸小檗碱的含量测定标准未作规定。目前文献报道的测定方法有薄层扫描法、脉冲极谱法、分光光度法、示波极谱法和离子选择电极法等。

本方法为高效液相色谱法，紫外吸收检测器于波长347nm处检测盐酸小檗碱的吸收值，外标法计算含量。本法操作简便、精密度高、分离效果良好。

盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所,713 9204);乙腈为色谱纯,水为高纯水,甲醇、三乙胺、磷酸为分析纯;三黄片为市售品。

1 仪器

1.1仪高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱工作站

1.2 色谱柱

色谱柱:ＫＦ Ｃ18(250ｍｍ×4.6ｍｍ,10μｍ,中国科学院大连化学物理研究所) ,柱温:室温

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 0.05ｍｏｌ·Ｌ^-1三乙胺溶液(用磷酸调节ｐＨ至3.0)=35 65;流速:1.0ｍＬ·ｍｉｎ^-1

2.2 检测波长：347nm，进样量:20μＬ。

1. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品适量,加流动相制成36μｇ·ml^-1的对照品溶液。

2.供试品溶液的制备

取本品20片,除去包衣,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于盐酸小檗碱1.8ｍｇ),置50ml量瓶中,加流动相适量,超声处理5min,加流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,再经0.45μｍ的微孔滤膜滤过后,即得。取大黄粉、黄芩浸膏和其它辅料,按处方比例同法制得三黄片阴性空白溶液。

1. 标准曲线的绘制

分别吸取上述对照品溶液1，2，3，4，5，6ml，分别置10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,进样10μl测定,以盐酸小檗碱的进样量(μg) 为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长347nm处测定吸收值，计算出其含量。

周文枭,曾立威,刘伟林. HPLC 测定三黄片中盐酸小檗碱的含量.华西药学杂志，2004，19（3)：220-221

李小燕.ＨＰＬＣ法测定三黄片中盐酸小檗碱的含量. 中成药，2002， 24（9)：679-680