三黄片—黄芩苷的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定三黄片中黄芩苷的含量。

本方法适用于由由大黄、盐酸小檗碱和黄芩浸膏等组成的片剂。

供试品除糖衣，精密称定，加乙醇进行超声处理，超声后溶液定容进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长315nm处检测黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 乙醇 （分析纯)

3. 磷酸（分析纯)

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Phenomenex luna C₈柱（150×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水 磷酸=45 55 0.2

2.2 检测波长：315nm

2.3柱温：22℃

1. 称取供试品

取样品20片，除去糖衣，精密称定。研细，混匀，取约0.1g，精密称定。

2. 对照品溶液的制备

精密称取黄芩苷对照品5mg，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混匀，即得（每1ml含黄芩苷约0.1mg)。

3.供试品溶液的制备

将精密称定的样品置100ml量瓶中, 加70%乙醇至刻度,摇匀后超声处理20min, 放冷, 静置, 取上清液用0.45um滤膜过滤后供HPLC进样。

1. 标准曲线的绘制

精密量取上述对照品溶液1，2，3，4，5，6ml，分别置25ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,进样10μl测定,以黄芩苷的进样量(μg) 为横坐标,峰面积为纵坐标,得回归方程

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长315nm处测定黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

蔡为群, 顾雪中.高效液相色谱法测定三黄片中黄芩苷的含量.时珍国医国药，2003，14（3)：136-137

吴海菁. HPLC法测定三黄片中黄芩苷的含量.海峡药学，2003，15（2)：34-36