八珍丸—芍药苷的测定—高效毛细管电泳法

本方法采用高效毛细管电泳测定八珍丸中芍药苷的含量。

本方法适用于八珍丸（水蜜丸)。

供试品于锥形瓶中，加50%乙醇浸渍，浓缩，浓缩液进入高效毛细管电泳仪进行分离，用紫外吸收检测器，于波长230nm处检测芍药苷的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2 .硼砂（分析纯)

3 .芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所)

4 .八珍丸(水蜜丸)(市售品)

1 仪器

1.1 高效毛细管电泳

1.2 色谱柱

融熔石英毛细管柱(未涂渍) 50μm ×50cm(有效分离长度4515cm , 河北永年光导纤维厂)。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：50mmol/L 硼砂缓冲液,用氢氧化钠调pH为10.6。

2.2 检测波长：230nm

2.3柱温： 20℃

1. 称取供试品

水蜜丸约6g，精密称定。

2. 对照品溶液的制备

精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36h 的芍药苷10.0mg ,用甲醇定容成浓度为1.0mg/ml 的对照品储备液。

3. 标准溶液的制备

精密量取对照品储备液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4. 供试品溶液的制备

将供试品加5 g 硅藻土混合, 研细, 置50 mL 具塞锥形瓶中,加50%乙醇40mL，于40℃水浴浸渍4h，时时振摇, 滤过, 滤渣用50 %乙醇洗涤6次, 每次10 mL , 洗涤液与滤液合并, 浓缩,残渣加50 %乙醇溶解, 转移至10 mL 量瓶中, 用50 %乙醇稀释至刻度, 摇匀, 即得。

1. 标准曲线的绘制

上述标准溶液压力进样1nL到高效毛细管电泳仪，用紫外吸收检测器，于波长230nm处测定芍药苷的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

运行缓冲液:50mmol/L 硼砂缓冲液,用氢氧化钠调pH为10.6 ; 操作电压: 20KV , 极性由正到负;采用压力进样,压力进样常数为10psi×S。运行缓冲液和样品溶液均经0.45μm 微孔滤膜过滤后使用。

毛细管冲洗方法: 每次开机用超纯水冲洗3min , 后用0.1mol/L 氢氧化钠冲洗3min ,再用超纯水冲洗3min ,然后运行缓冲液冲洗3min 。每次测定之间用运行缓冲液冲洗1min 。

供试品溶液压力进样1nL到高效毛细管电泳仪，用紫外吸收检测器，于波长230nm处测定芍药苷的吸收值，外标法计算出其含量。

陈勇川，朱卫民，刘松青.高效毛细管电泳法测定八珍丸和八珍益母丸中芍药苷的含量.中国药房，2003，13（7)：425-427