方法名称： |
导赤丸－盐酸小檗碱的测定－薄层扫描荧光法 |
应用范围： |
本方法采用薄层扫描法测定导赤丸中盐酸小檗碱的含量。 本方法适用于中成药导赤丸。 |
方法原理： |
供试品本品加盐酸-甲醇(1∶100)，浸泡过夜，超声，滤过， 制成供试液，点样、展开，用薄层扫描仪进行荧光锯齿扫描，激发波长366nm测量盐酸小檗碱吸收度积分值，计算其含量。 |
试剂： |
1.盐酸 2.甲醇 3.苯 4.醋酸乙酯 5.异丙醇 6.浓氨溶液 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 薄层扫描仪 1.2点样器 一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.3展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。 1.4吸附剂 硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。 1.5 薄层板 硅胶G薄层板 2 试验条件 2.1展开剂：苯＋醋酸乙酯＋甲醇＋异丙醇＋水＝6＋3＋1.5＋1.5＋0.3)，置氨蒸气饱和的层析缸内展开。 2.2 扫描方式：荧光锯齿扫描，激发波长366nm。 |
试样制备： |
1.对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1mL含0.025 mg的溶液，作为对照品溶液。 2.供试品溶液的制备 取本品1g，剪碎，精密称定，置100mL量瓶中，加水5mL，放置使溶散，加入盐酸-甲醇(1∶100)约80mL，60℃水浴中加热15min，超声处理15min，放至室温加盐酸-甲醇(1∶100)稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5mL，通过中性氧化铝柱(100～200目，3g，0.9cm)，以乙醇25mL洗脱，洗脱液蒸干，用甲醇溶解并定容于5mL量瓶中，作为供试品溶液 |
操作步骤： |
1.标准曲线的建立 精密吸取盐酸小檗碱对照品对照品溶液(25.072mg/ul)1、2、3、4、5mL，点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，晾干，扫描，测定峰面积，计算回归方程Y=312.0236 2055.577X，r=0.9997；线性范围为0.25072～0.22536μg。 2.供试品含量测定 精密吸取供试品溶液4μL，对照品溶液2μL与4μL，分别交叉点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂硅胶GF254薄层板上，按标准曲线项下方法展开，扫描测定，按外标二点法计算盐酸小檗碱含量。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
参考文献： |
邬国庆，周富荣，薄层扫描法测定导赤丸中盐酸小檗碱的含量，中国中药杂志，1999，24（7)：412～413 |
