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桂林西瓜霜喷剂—苦参碱的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 桂林西瓜霜喷剂—苦参碱的测定—高效液相色谱法
方法名称:
桂林西瓜霜喷剂—苦参碱的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定桂林西瓜霜喷剂中苦参碱的含量。

本方法适用于中成药桂林西瓜霜喷剂。

方法原理:

供试品置具塞锥形瓶中,加氨水湿润,氯仿超声提取,合并氯仿液过中性氧化铝柱,收集过柱氯仿液,再以氯仿-甲醇洗脱,收集洗脱液将上述两液合并,水浴蒸干,残渣用甲醇溶解得供试品溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长205nm处检测苦参碱的吸收值,计算出其含量。

试剂:

1.乙腈(色谱纯)

2.硫酸铵(0.025mol/L)

3.十二烷基硫酸钠

仪器设备:

1.仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

NoVa-Pak C18柱(4μm,150mm×3.9mm id)

1.3紫外吸收检测器

2.色谱条件

2.1流动相:乙腈 0.025mol/L硫酸铵 + 十二烷基硫酸钠 = 35 65 0.6g

2.2检测波长:205nm

试样制备:

1.称取供试品

精密称取供试品2g。

2.对照品溶液的制备

精密称取苦参碱对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.503mg的溶液,作为对照品溶液。

3.供试品溶液的制备

将上述供试品置具塞锥形瓶中,加氨水2mL湿润,然后加氯仿超声提取(30mL×3)30min,合并氯仿液并加在中性氧化铝柱(内径1.0cm,装高5cm)上,收集过柱氯仿液,再以氯仿-甲醇(7:3)20mL洗脱,收集洗脱液将上述两液合并,置60℃水浴蒸干,残渣用甲醇溶解定容至5mL摇匀,过滤,取续滤液为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

1.标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液4、8、12、16、20μL分别注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长205nm处测定苦参碱的吸收值,以苦参碱含量Y(μg)为纵坐标,峰面积值X为横坐标,绘制标准曲线。

2.供试品的测定

取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长205nm处测定苦参碱的吸收值,计算出其含量。

参考文献:

路玫,黄雪梅.HPLC法测定桂林西瓜霜喷剂中苦参碱的含量.华西药学杂志,2001,16(1):76-78

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