注射用苄星青霉素－苄星青霉素－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定注射用苄星青霉素中苄星青霉素的含量。

本方法适用于注射用苄星青霉素。

1. 乙腈

2. 磷酸盐缓冲液（0.05mol/L)

3. 氢氧化钠溶液（1mol/L)

4. 甲醇

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按苄星青霉素峰计算应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相：0.05mol/L磷酸盐缓冲液 乙腈=75 25

2.2 检测波长：225nm

2.3 柱温：室温

2.4 流速：1mL/min

1. 磷酸盐缓冲液（0.05mol/L)

取磷酸二氢钾6.8g，加水900mL使溶解，用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0，加水至1000mL，摇匀。

2. 氢氧化钠溶液（1mol/L)

取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液56mL，加新沸过的冷水使成1000mL，摇匀。

3. 对照品溶液的制备

精密称取青霉素对照品约40mg，置50mL量瓶中，加乙腈10mL和甲醇5mL使溶解，用上述0.05mol/L磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。

4. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取约53mg，置50mL量瓶中，加乙腈10mL和甲醇5mL使溶解，用上述0.05mol/L磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，二部，p.228。