弧菌属 （甲类传染病：鼠疫、霍乱。HIV、SARS等属乙类，按甲类对待) 弧菌属（Vibrio)细菌是一大群菌体短小，弯曲成弧形的革兰阴性菌，本菌属与肠杆菌科的主要不同点是氧化酶试验阳性（麦契尼可夫弧菌除外)和有一根位于菌体一端的单鞭毛。弧菌属细菌广泛分布于自然界，以水中最多。本菌属目前有36个种，其中至少有12个种与人类感染有关，尤以霍乱弧菌，副溶血性弧菌最为重要。 第一节 霍乱弧菌 霍乱弧菌（V.cholerae)是引起烈性传染病霍乱的病原体，二千多年前已有记载。自1817年以来，已发生过7次世界性霍乱大流行，前6次均由霍乱弧菌古典生物型引起，1961年开始的第7次大流行由霍乱弧菌El Tor生物型引起。1992年一个新的流行株O139(Bengal)在沿孟加拉弯的印度和孟加拉一些城市出现，并很快传遍亚洲，这是首次由非O1群霍乱弧菌引起的流行。且每次都涉及到中国（贫穷落后有关)。 一、生物学性状
1．形态与染色 霍乱弧菌菌体大小为0.5～0.8?1.5-3?m。从病人新分离出的细菌形态典型，呈弧型或逗点状。但经人工培养后，细菌常呈杆状而不易与肠道杆菌区别。革兰染色阴性。特殊结构有菌毛，无芽胞，有些菌株（包括O139)有荚膜，在菌体一端有一根单鞭毛。若取病人米泔水样粪便或培养物作悬滴观察，细菌运动非常活泼，呈穿梭样或流星状。 ２.培养特性与生化反应兼性厌氧，营养要求不高。生长繁殖的温度范围广（18-37?)，故可在外环境中生存。耐碱不耐酸，在pH8.8-9.0的碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生长良好，因其它细菌在此pH中不易生长，故初次分离霍乱弧菌常用碱性蛋白胨水增菌。霍乱弧菌可在无盐环境中生长，而其它致病性弧菌则不能。霍乱弧菌为过氧化氢酶阳性，氧化酶阳性，能发酵很多常见的单糖、双糖和醇糖，如葡萄糖、蔗糖和甘露醇，产酸不产气；不分解阿拉伯胶糖；能还原硝酸盐，吲哚反应阳性。 ３.抗原构造与分型 霍乱弧菌有耐热的0抗原和不耐热的H抗原。根据0抗原不同，现已有155个血清群，其中O1群、O139群引起霍乱，其余的血清群分布于地面水中，可引起人类胃肠炎等疾病，但从未引起霍乱的流行。H抗原无特异性，免疫扩散试验表明所有霍乱弧菌拥有相同的H抗原。 O1群霍乱弧菌根据其菌体抗原由3种抗原因子A、B、C组成，又可分为3个血清型：小川型(Ogawa)、稻叶型（ Inaba)、和彦岛型(Hikojima)。（原型、异型、中间型；台湾型、韩国型、日本型)
根据表型差异，O1群霍乱弧菌的每一个血清型还可分为2个生物型，即古典生物型（classical biotype)和El Tor生物型（El Tor biotype)因在埃及西奈半岛El Tor检疫站首次分离出而命名)。古典生物型不溶解羊红细胞，不凝集鸡红细胞，对50IU的多粘菌素敏感，可被第IV群噬菌体裂解，而El Tor弧菌则完全相反。
O139群在抗原性方面与O1群之间无交叉，序列分析发现O139群失去了O1群的0抗原基因，出现了一个约36 kb的新基因，编码与O1群不同的脂多糖抗原和荚膜多糖抗原，但与O22和O155等群可产生抗原性交叉。在遗传性方面，如核糖型，限制性酶切电泳图谱，外膜蛋白，毒性基因等则与O1群的古典型和El Tor生物型的流行株相似。
4．抵抗力 El Tor生物型和其它非01群霍乱弧菌在外环境中的生存力较古典型为强，在河水、井水及海水中可存活1-3周，有时还可越冬。本菌不耐酸，在正常胃酸中仅能存活4分钟。55?C湿热15分钟，100?C煮沸1-2分钟，0.5ppm氯15分钟能杀死霍乱弧菌。以1：4比例加漂白粉处理病人排泄物或呕吐物,经1小时可达到消毒目的。
二、 致病性
１．致病物质 霍乱弧菌的致病物质涉及到染色体上多个基因，它们主要包括由ToxR蛋白调控的ctxA、ctxB、tcp、zot、ace等基因，另外还有二个不受ToxR蛋白调控的毒力因子基因hlyA和hap。
1)霍乱肠毒素 是目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素，是肠毒素的典型代表。由一个A亚单位（分子量为27.2kDa)和5个相同的B亚单位（每个亚单位分子量为11.7kDa)构成的一个热不稳定性多聚体蛋白，分别由结构基因ctx（cholera toxin)A和ctxB编码。ctxAB操纵子位于染色体上称作核心区的部位，核心区的两端为重复序列（RS1)。霍乱弧菌古典生物型染色体上广泛散布着以2拷贝ctx为一组的CTX单元，。El Tor生物型染色体上CTX则为多拷贝随机分布。B亚单位可与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞，A亚单位在发挥毒性作用前需经蛋白酶作用裂解为A1和A2两条多肽。A1作为腺苷二磷酸核糖基转移酶可使NAD（辅酶I)上的腺苷二磷酸核糖转移到G蛋白上，称GS，GS的活化可使细胞内cAMP水平升高，主动分泌Na+、K+、HCO3—和水，导致严重的腹泻与呕吐。
此外，在ctx操纵子上游还存在两个编码毒性相关的zot (zonula occludens toxin ，小带联结毒素) 、ace (accessory cholera enterotoxin)基因。在实验兔中，其编码产物Zot能增加肠粘膜的通透性；Ace使结扎的回肠段中液体聚积。志愿者口服ctxAB缺失的基因工程变异株产生的轻度腹泻可能与这二个毒性基因有关。
2)鞭毛、菌毛及其它毒力因子 霍乱弧菌活泼的鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞。细菌的普通菌毛是细菌定居于小肠所必须的因子。只有粘附定居后方可致病。与此相关基因有acf和 tcpA。Acf (accessory colonization factor) 编码粘附素； tcpA (toxin coregulated pilus A) 编码菌毛蛋白中一个分子量为20.5kDa的重要亚单位。实验发现使tcp失活后，变异株即失去定居功能和致泻特性。其他毒力因子还有hlyA（hemolytic-cytolytic A)基因编码的具有溶血-溶细胞的蛋白；hap(hemagglutinin/protease)基因编码的有助于细菌从死亡细胞上解离的血凝素/蛋白酶。
O139群除具有上述O1群的致病物质和相关基因外，还存在多糖荚膜和特殊LPS毒性决定簇，其功能是抵抗血清中杀菌物质和能粘附到小肠粘膜上，不表达LPS决定簇和荚膜的TnphoA突变株则对血清易感。 ２．所致疾病 引起烈性肠道传染病霍乱，为我国的甲类法定传染病。在自然情况下，人类是霍乱弧菌的唯一易感者。在地方性流行区，除病人外，无症状感染者也是重要传染源。传播途径主要是通过污染的水源或食物经口摄入，人与人之间的直接传播不常见。在正常胃酸条件下，需要进入大量的细菌（108 )方能引起感染，但当胃酸低时，感染剂量可减少到103-105个细菌。病菌到达小肠后，粘附于肠粘膜表面并迅速繁殖，不侵入肠上皮细胞和肠腺，细菌在繁殖过程中产生肠毒素而致病。O1群霍乱弧菌感染可从无症状或轻型腹泻到严重的致死性腹泻，霍乱弧菌古典生物型所致疾病较El tor生物型严重。典型病例一般在吞食细菌后2-3天突然出现剧烈腹泻和呕吐，在疾病最严重时，每小时失水量可高达1升，排出如米泔水样腹泻物。由于大量水分和电解质丧失而导致失水，代谢性酸中毒，低碱血症和低容量性休克及心力不齐和肾衰竭，如未经治疗处理，病人死亡率高达60%，但若及时给病人补充液体及电解质，死亡率可小于1%。O139群霍乱弧菌感染比O1群严重，表现为严重脱水和高死亡率，又成人病例所占比例较高〈70%，而O1群霍乱弧菌流行高峰期，儿童病例约占60%。
病愈后一些患者可短期带菌，一般不超过2周，个别El Tor型病例病后可带菌长达数月或数年之久。病菌主要存在于胆囊中。
３．免疫性 对O1群霍乱弧菌感染的研究和历次霍乱流行的观察，表明感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力，再感染少见。病人发病数月后，血液中和肠腔中可出现保护性的抗肠毒素抗体及抗菌抗体，抗肠毒素抗体主要针对霍乱毒素B亚单位，抗菌抗体主要针对O抗原。肠腔中的sIgA可凝集粘膜表面的医学全.在线www.med126.com病菌，使其失去动力；可与菌毛等粘附因子结合，阻止霍乱弧菌粘附至肠粘膜上皮细胞；可与霍乱肠毒素B亚单位结合，阻断肠毒素与小肠上皮细胞受体作用。霍乱弧菌引起的肠道局部粘膜免疫是霍乱保护性免疫的基础。
感染O139群的病人大多为成年人，表明以前感染O1群获得的免疫对O139群感染无交叉保护作用。O139群感染后的免疫应答与O1群基本一致。家兔肠道结扎实验和小鼠攻击实验证明，O139群的保护性免疫以针对脂多糖和荚膜多糖的抗菌免疫为主，抗毒素免疫为辅。O1群的脂多糖O抗原与O139群存在显著差异，且还缺少荚膜多糖表面抗原，故其引起的免疫不能交叉保护O139群的感染。
三、微生物学检查法
霍乱是烈性传染病，对首例病人的病原学诊断应快速、准确，并及时作出疫情报告。
标本 病人粪便，肛拭；流行病学调查还包括水样。霍乱弧菌不耐酸和干燥。为避免因粪便发酵产酸而使病菌灭活，标本应及时培养或放入Cary-Blair保存液中运输；肠道病原菌常用的甘油盐水缓冲保存液不适宜。
直接镜检 革兰染色阴性弧菌，悬滴法观察细菌呈穿梭样运动有助于诊断。
分离培养 常将标本首先接种至碱性蛋白胨水增菌，37?C孵育6-8小时后直接镜检并作分离培养。目前常用的选择培养基为TCBS，该培养基含有硫代硫酸盐、枸橼酸盐、胆盐及蔗糖，霍乱弧菌因分解蔗糖呈黄色菌落。挑选可疑菌落进行生化反应及与O1群多价和单价血清作玻片凝集反应。目前还需与O139群抗血清做凝集反应。其它分离培养基还有碱性平板、血平板和TTGA培养基等。
四 防治原则
改善社区环境，加强水源管理；培养良好个人卫生习惯，不生食贝壳类海产品等是预防霍乱弧菌感染和流行的重要措施。（苍蝇的消化道传染病的罪魁祸首)
疫苗预防长期以来使用O1群霍乱弧菌死菌苗肌肉注射，虽可增强人群的特异性免疫力，但保护力仅为50%左右，且血清抗体持续时间较短，仅为3-6个月。在认识到肠道局部免疫对霍乱预防起主要作用后，目前霍乱疫苗预防的重点已转至研制口服菌苗的方向上，包括B亚单位-全菌灭活口服疫苗、基因工程减毒活菌苗（用基因工程技术去除O1群霍乱弧菌野生株DNA中大部分毒力基因的活疫苗)、带有霍乱弧菌几个主要保护性抗原的基因工程疫苗等。其中前两种疫苗已进行过大规模人群试验，对其有效保护率和保护时间正在进行评估，且在某些国家已获准使用。0139尚无预防性疫苗，候选菌苗正在研制中，思路是制成包括预防O1群和O139群霍乱弧菌感染的二价菌苗。
及时补充液体和电解质，预防大量失水导致的低血容量性休克和酸中毒是治疗霍乱的关键；抗生素的使用可减少外毒素的产生，加速细菌的清除，用于霍乱的抗菌药物有四环素、强力霉素、呋喃唑酮、氯霉素和复方SMZ-TMP等。但带有多重耐药质粒的菌株在增加；且O139群的耐药性强于O1群，给治疗带来一定困难。
第二节 副溶血性弧菌
副溶血性弧菌（V.parahemolywww.med126.com/wszg/ticus)于1950年从日本一次暴发性食物中毒中分离发现。该菌存在于近海的海水、海底沉积物和鱼类、贝壳等海产品中。根据菌体O抗原不同，现已有13个血清群。主要引起食物中毒，尤以日本、东南亚、美国及我国台北地区多见，也是我国大陆沿海地区食物中毒中最常见的一种病原菌。
一、生物学特性 同其它引起人类感染的弧菌种类一样，该菌与霍乱弧菌的一个显著差别是嗜盐（halophilic)，在培养基中以含3.5%NaCl最为适宜，无盐则不能生长，但当NaCl浓度高于 8%时也不能生长。在盐浓度不适宜的培养基中，细菌呈长杆状或球杆状等多形态。不耐热，90?C1分钟即被杀死；不耐酸，1%醋酸或50%食醋中1分钟死亡。
副溶血性弧菌在普通血平板（含羊、兔或马等血液)上不溶血或只产生?溶血。但在特定条件下，某些菌株在含高盐（7%)的、人O型血或兔血及以D-甘露醇作为炭源的我妻（Wagatsuma)琼脂平板上可产生?溶血，称为神奈川现象（Kanagawa phenomenon,KP)。日本学者检测了3370株副溶血性弧菌，来自病人的菌株中96.5%为KP+，而来自海产品及海水的菌株仅1%阳性。
二、致病性 引起食物中毒的确切致病机制尚待阐明。KP+菌株为致病性菌株基本肯定。现已从KP+菌株分离出二种致病因子，其一为耐热直接溶血素（thermostable direct hemolysin ,TDH),动物实验表明具有细胞毒和心脏毒两种作用。其基因为双拷贝（tdh1和tdh2)，KP实验中的溶血现象即由tdh2位点决定。最近的研究还表明，tdh基因家族也广泛存在于人类致病性弧菌中，如大多数霍利斯弧菌菌株（V.hollisae)，某些拟态弧菌菌株(V.mimicus)中有tdh基因，非O1群霍乱弧菌中也存在同源性约为93%-96%的tdh相关基因，提示该基因与致病关系密切。另一个致病因子为耐热相关溶血素（ thermostable related hemolysin TRH)生物学功能与TDH相似，其基因与 tdh同源性为68%。
其它致病物质可能还包括粘附素和粘液素酶。
该菌引起的食物中毒经烹饪不当的海产品或盐腌制品所传播。常见的为海蛰、海鱼、海虾及各种贝类，因食物容器或砧（zhen真)板生熟不分污染本菌后，也可发生食物中毒（生熟分开，两个砧板)。该病常年均可发生，潜伏期5-72小时，平均24小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样病症，有腹痛、腹泻、呕吐和低热，粪便多为水样，少数为血水样，恢复较快，病后免疫力不强，可重复感染。
该菌还可引起浅表创伤感染、败血症等。
三、诊断 标本采取患者粪便、肛拭或剩余食物，直接分离培养于SS琼脂平板或嗜盐菌选择平板。如出现可疑菌落，进一步作嗜盐性试验与生化反应，最后用诊断血清进行鉴定。最近已发展了基因探针杂交及PCR快速诊断法，可直接从原始食物标本或腹泻标本中检测耐热毒素基因。
四、防治原则 治疗可用抗菌药物，如庆大霉素或复方SMZ -TMP，严重病例需输液和补充电解质。 第三节 幽门螺杆菌
螺杆菌属（Helicobacter)是从弯曲菌属中划分出来的新菌属，只在37℃生长而在25℃和42℃均不能生长的革兰阴性螺形杆菌。至少有9个种，代表菌种是幽门螺杆菌（H.pylori)。它与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃溃疡关系密切，可能与胃癌的发生也有关。
生物学特性 革兰阴性。菌体细长弯曲呈螺形、S形或海鸥状，大小为0.3～1.0×2.0～5.0μm。在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列，传代培养后可变成杆状或球形。菌体一端或两端可有多根带鞘鞭毛，运动活泼。
微需氧菌。最适生长温度为35～37℃。营养要求高，需血液或血清，生长时还需一定湿度（相对湿度98％)。培养3d可见细小、针尖状、半透明的菌落。
生化反应不活泼，不分解糖类，氧化酶和过氧化氢酶均阳性，脲酶丰富，快速脲酶试验强阳性。幽门螺杆菌菌株具有共同抗原，其表面蛋白在不同株之间相似，电泳时出现4条主要区带。用免疫印迹分析证明幽门螺杆菌与空肠弯曲菌等的菌体外膜蛋白不出现交叉反应，但其鞭毛蛋白具有明显的交叉反应。
致病性与免疫性 幽门螺杆菌病的确切机制尚未完全阐明，引起胃炎与消化性溃疡可能是多种因子的协同作用，如粘附素、脲酶、蛋白酶、细胞毒素和内毒素等的毒害作用。幽门螺杆菌存在于胃粘膜，与人类B型慢性胃炎、消化性溃疡等密切相关。在胃炎和胃溃疡患者的胃粘膜中，本菌的检出率高达80％～100％。另据研究，幽门螺杆菌感染是胃癌的危险因子。幽门螺杆菌阳性的宿主常出现胃上皮细胞增生，幽门螺杆菌感染时胃内亚硝胺、亚硝基化合物增多，一氧化氮的合成可致DNA亚硝化脱氨作用，从而有可能使细胞发生突变。有报道在cagA基因阳性菌株感染的患者中，有62％出现萎缩性胃炎，2％发展为胃癌，故认为cagA基因与胃癌发生相关。
感染幽门螺杆菌后，在病人血液和胃液中能检出特异性IgG、IgM和IgA抗体；亦产生多种细胞因子，但各作用不同，如IL－2、IL－6可能对抗感染有利，而IL－8、TNF等可能与致病有关。
诊断与防治 组织活检标本可用于组织学检查或将活检组织磨碎用于分离培养、血液用于测抗体含量。快速诊断方法有：①直接涂片镜检：为革兰阴性，细长弯曲呈海鸥状细菌。②快速脲酶分解试验：用尿素培养基，如培养基由黄变红为阳性。③血清学诊断：检测血清中抗幽门螺杆菌菌体抗体与抗脲酶抗体。④分子生物学技术：用16SrDNA寡核苷酸探针或用PCR检测幽门螺杆菌。分离培养则用选择培养基在微需氧和湿润的环境中，35℃孵育4天观察菌落。再以氧化酶、过氧化氢酶及脲酶试验进行鉴定。
目前正在试用重组脲酶幽门螺杆菌疫苗，并证明疫苗不仅有预防作用，同时还具有治疗作用。治疗可用抗菌疗法，多采用以胶体次枸橼酸铋或抑酸剂为基础，再加两种抗生素的三联疗法第一节 弯曲菌属
第四节 弯曲菌 弯曲菌属（Campylobacter)是一类呈逗点状或S形的革兰阴性杆菌。有13个种，广泛分布于动物界，可引起动物和人类的腹泻、胃肠炎和肠道外感染。对人致病的有空肠弯曲菌、大肠弯曲菌、胎儿弯曲菌等，其中以空弯曲菌（C。jejuni)
空肠弯曲菌
生物学特性 形态细长，呈弧形、螺旋形、S形或海鸥状。运动活泼，一端或两端有单鞭毛。无芽胞，无荚膜，革兰阴性。
微需氧，需在5％O2、10％CO2和85％N2的环境中生长。在36～37℃生长良好，但在42℃中选择性好，此温度可使粪便中其他细菌的生长受到抑制。营养要求高，用含血清的培养基培养后，在同一培养基上可出现两种菌落，一种为灰白、湿润、扁平边缘不整的蔓延生长的菌落；另一种为半透明、圆形、凸起、有光泽的细小菌落。
生化反应不活泼，不发酵糖类，氧化酶阳性，马尿酸盐水解试验阳性。
有菌体（O)抗原、热不稳定抗原和鞭毛（H)抗原。根据（O)抗原不同将空肠弯曲菌分为42个血清型。
抵抗力较弱。培养物放置冰箱中很快死亡，56℃5min即被杀死。干燥环境中仅存活3h，培养物放室温可存活2～24周。
致病性与免疫性 空肠弯曲菌引起胃肠道感染主要是该菌产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素，后者与大肠埃希菌的LT和霍乱肠毒素有部分抗原交叉。
空肠弯曲菌是引起散发性细菌性肠炎最常见的菌种之一。该菌常通过污染饮食、牛奶、水源等被食入，或与动物直接接触被感染。由于空肠弯曲菌对胃酸敏感，经口食入至少104个细菌才有可能致病，该菌在小肠内繁殖，侵入肠上皮引起炎症。临床表现为痉挛性腹痛、腹泻、血便或果酱样便，量多；头痛、不适、发热。通常该病自限，病程5～8d。
机体感染空肠弯曲菌后可产生特异性抗体，能通过调理作用和活化补体等作用增强吞噬细胞的吞噬、杀灭细菌及补体的溶菌作用。
诊断与防治 可用粪便标本涂片、镜检，查找革兰氏阴性弧形或海鸥状弯曲菌，或用悬滴法观察鱼群样运动或螺旋式运动。分离培养可直接用选择性培养基，于42℃和37℃微需氧环境下培养，可见两种类型的菌落。鉴定用马尿酸水解试验、醋酸吲哚酚水解试验等生化反应以及PCR法直接检出粪便中的弯曲菌。
目前尚无特异性疫苗。预防主要是注意饮水和食品卫生，加强人、畜、禽类的粪便管理。治疗可用红霉素、氨基糖苷类抗生素、氯霉素等。
第五节 变形杆菌及其它菌 自己看 | 
