药物分析-授课教案:第二章药物的鉴别试验

基本内容

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一、 概 述

依据药典进行的药物分析主要有三大项：鉴别、检查和含量测定。

药物的鉴别试验（identification test)是用于鉴别药物的真伪，在药物分析中属首项工作，只有证实被分析的药物是真的，才有必要接着进行检查、含量测定。

 药典所收载的药物项下的鉴别试验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物。它与分析化学中的定性鉴别有所区别。这些试验方法不能赖以鉴别未知物。

原料药：鉴别试验结合性状项下的外观和物理常数进行确证。

二、鉴别的项目

（一)性状 药物的性状反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、嗅、味、溶解度以及物理常数等。

（二)一般鉴别试验（general identification test)

 *以药物的化学结构及其物理化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物真伪的。

 *无机药物：根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应，并以药典附录III项下的一般鉴别试验为依据。 *有机药物：采用典型的官

能团反应。

*一般鉴别试验的项目： 丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物类、无机金属盐类（钠盐、钾盐、锂盐、钙盐、钡盐、铵盐、镁盐、铁盐、铝盐、锌盐、铜盐、银盐、汞盐、铋盐、锑盐、亚锡盐)、有机酸盐（水杨酸盐、枸橼酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐)、无机酸盐（亚硫酸盐或亚硫酸氢盐、硫酸盐、硝酸盐、硼酸盐、碳酸盐与碳酸氢盐、醋酸盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物)。

*一般鉴别试验仅供确认单一的化学药物，如为数种化学药物的混合物或有干扰物质存在时，除另有规定外，应不适用。

*通过一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。

1.有机氟化物

(1)．鉴别试验 取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法（附录VII　C)进行有机破坏，用水20ml与0.01mol/L氢氧化钠溶液6.5ml为吸收液，俟燃烧完全后，充分振摇；取吸收液2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml，用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml，即显蓝紫色；同时做空白对照试验。

(2)．试验原理 有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏，为碱性溶液吸收成为无机氟化物后，与茜素氟蓝、硝酸亚铈形成蓝紫色络合物。 　

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例如，经一般鉴别反应的钠盐试验，证实某一药物为钠盐，但不能辨认是氯化钠、苯甲酸钠或者是其它某一种钠盐药物。要想最后证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。

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2.有机酸盐

(1).水杨酸盐

鉴别试验一  取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。

原理 本品在中性或弱酸性条件下，和三氯化铁试液生成配位化合物，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色；若在强酸性中，配位化合物分解生成游离水杨酸。 　　

本反应极为灵敏，只需取稀溶液进行试验，如取用量大，产生颜色过深时，可加水稀释后观察。 　　

鉴别试验二   取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。

原理  水杨酸不溶于水（0℃时溶解度为1g/1500L)，故供试液加酸即析出游离水杨酸。由于水杨酸的酸性（K＝1.06×10^-3，25℃)大于醋酸（K＝1.85×10^-5，25℃)，故能与醋酸铵作用释出醋酸，而本身形成铵盐溶解。析出的水杨酸亦可经冷水洗涤、干燥后测定熔点（158℃-161℃)。

(2)．苯甲酸盐 3．乳酸盐 4．枸橼酸盐 5．酒石酸盐 6．醋酸盐

鉴别试验 取供试品，加硫酸和乙醇后加热，即产生乙酸乙酯的香气。

3.无机金属盐

(1)．钠盐

鉴别试验  取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。

原理 钠的火焰光谱在可见光区，有589.0nm、589.6nm主要谱线，故其燃烧火焰显黄色。

本焰色反应极为灵敏（最低检出限量为0.1ng钠离子)。因此，对所用仪器和试剂要求必须很严格。在检测前应将铂丝烧红，趁热浸入盐酸中，如此反复数次，直至火焰不染黄色后，再蘸取供试品进行测定。只有当强烈的黄色火焰持续数秒钟不退，才能确认为钠盐。

(2)．钾盐 　　

鉴别试液   焰色反应显紫色，但有少量钠盐混存时，须隔色玻璃透视，方能辨认。

原理 钾的火焰光谱在可见光区有766.49nm、769.90nm与404.4nm几条谱线，其中以766.49nm与769.90nm两条谱线最强。由于人眼在此波长附近敏感度较差，故钾盐的燃烧火焰显紫色。如有钠盐混存，因钠焰灵敏度很高，需透过蓝色钴玻璃将钠焰黄色滤去，此时火焰显粉红色。

(3)．钙盐

鉴别试验一 焰色反应显砖红色（622nm)。、

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 (4)．铵盐

鉴别试验  取供试品，加过量氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。

原理  其反应式为：　

4.无机酸根

（1)氯化物

鉴别一　

　如供试品为生物碱或其他有机碱的盐酸盐，须先加氨试液使成碱性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行试验。

鉴别二

能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。

（2)硫酸盐

　鉴别一　取供试品溶液，加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。

　鉴别二　取供试品溶液，加醋酸铅试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。

（三)专属鉴别试验（specific identification test)

*根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应，来鉴别药物真伪的。是证实某一种药物的依据。

综上所述，一般鉴别试验是以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类别www.med126.com的药物。而专属鉴别试验，则是在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差异，来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终确证药物真伪的目的。

20min

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三、鉴别方法

（一)化学鉴别法

1．干法　将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般是高温)进行试验，观测此时所发生的特异现象。

(1)焰色试验:常用干法，利用某些元素所具有的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。

方法为：取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。

(2)加热分解:在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体。

2．湿法 系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条件下进行反应，发生易于观测的化学变化，如颜色、沉淀、气体、荧光等。

(1)呈色反应鉴别法：系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。在鉴别试验中最为常用的反应类型有： 1)三氯化铁呈色反应---酚羟基或水解后产生酚羟基； 2)异羟肟酸铁反应---多为芳酸及其酯类、酰胺类； 3)茚三酮呈色反应---脂肪氨基； 4)重氮化-偶合显色反应---芳伯氨基或能产生芳伯www.med126.com氨基； 5)氧化还原显色反应及其它颜色反应。

 （2)沉淀生成反应鉴别法：常用的这类反应有：１)与重金属离子的沉淀反应　在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀； 2)与硫氰化铬铵（雷氏盐)的沉淀反应　多为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐； 3)其它沉淀反应。

（3)荧光反应鉴别法：常用的荧光发射形式有以下类型： 1)药物本身可在可见光下发射荧光； 2)药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发射荧光； 3)药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光； 4)药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。

(4)气体生成反应鉴别法： 1)大多数的胺（铵)类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺)气； 2)化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体； 3)含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。

（二)光谱鉴别法

1．紫外光谱鉴别法 常用的方法有： 1)标准品对照法； 2)规定吸收波长法； 3)规定吸收波长和相应的吸收度法； 4)规定吸收波长和吸收系数法； 5)规定吸收波长和吸收度比值法。

 2．红外光谱鉴别法 红外光谱法是一种专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品)的鉴别方法。

1. 标准图谱对照法：中国药典（2005年版)和BP
2. 对照品法：USP。

10min

30min

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（三) X射线粉末衍射法

X射线(伦琴射线)

  波长为0.01～1(3)nm

   当X射线投身到晶体上时，各原子对入射X射线发生相干散射，干涉的结果可以使散射的X射线的强度增强或减弱发生相长干涉产生的X射线称为X射线的衍射线。

—布拉格公式

20min

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  （四)色谱鉴别法 利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（Rf值或保留时间)进行鉴别试验。常用的方法有：

1.薄层色谱鉴别法 在实际工作中，一般采用对照品（或标准品)比较法，要求供试品斑点的Rf值应与对照品斑点一致。

2.高效液相色谱鉴别法 一般规定按供试品含量测定项下的高效液相色谱条件进行试验。要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致。含量测定方法为内标法时，可要求供试品溶液和对照品溶液色谱图中药物峰保留时间与内标物峰的保留时间比值应相同。

3.气相色谱鉴别法 方法同高效液相色谱法。

4.纸色谱鉴别法 纸色谱法存在分离效能低、分析时间长等缺点，在药物鉴别试验中逐渐被薄层色谱法所取代。

15min

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   四、鉴别试验条件

（一)供试液浓度

（二)反应温度

（三)供试液pH值

（四)反应时间

（五)防止干扰

15min

问题讨论(5min)；

作业和习题布置2(min)；

归纳总结(3min)

小 结

1.从鉴别的意义、判断药物真伪，引出药物鉴别的重要性

2.讲清药典规定药物鉴别的项目，鉴别试验的条件及灵敏度的意义

复习思考题

或

作 业 题

1.简述鉴别试验的定义。

2.影响鉴别试验的因素有哪些？

3.常用的鉴别方法有哪些？

4.一般鉴别试验和专属鉴别试验。

教 学 效 果

与 分 析

1.结合已学分析化学知识，启发学生总结出药物的一般鉴别方法。

2.运用无机化学、有机化学知识，讲解各类有机物、无机物的鉴别

试验及原理。效果较好。