方法名称: |
清热解毒口服液-盐酸小檗碱的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定清热解毒口服液中盐酸小檗碱的含量。 本方法适用于清热解毒口服液中盐酸小檗碱的含量测定。 |
方法原理: |
供试品氨水碱化,水饱和的正丁醇萃取,蒸干正丁醇,残渣用甲醇溶解,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长346nm处检测盐酸小檗碱的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1.磷酸二氢钾 2.二次重蒸水 3.甲醇 4.磷酸 5.乙腈(色谱醇) 6.氨水 7.正丁醇 |
仪器设备: |
1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相:0.02mol/L磷酸二氢钾溶液 乙腈(60:40,用磷酸调节pH为2.3);流速:1.0ml/min。 2.2 检测波长:346nm 2.3 温度:室温。 |
试样制备: |
1. 对照品溶液的制备 准确称取盐酸小檗碱对照品18 mg,置100mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密吸取5ml,置l0ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 取本品1.0ml置分液漏斗中,加氨水调节pH10.0,振摇,用水饱和的正丁醇50ml,分5次萃取 (每次l0ml )。合并萃取液,水浴蒸去正丁醇后,残留物用甲醇溶解。溶液转移至l0ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度,作为供试品溶液。 注:“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤: |
分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长346nm处测定盐酸小檗碱的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
中成药,清热解毒口服液质量控制的研究,1997,19(1),p11。 |