| 公开(公告)号 | CN101092607A |
| 公开(公告)日 | 2007.12.26 |
| 申请(专利)号 | CN200710074498.6 |
| 申请日期 | 2007.05.17 |
| 专利名称 | 一种从贴底生长的细胞系获得细胞克隆球的方法 |
| 主分类号 | C12N5/06(2006.01)I |
| 分类号 | C12N5/06(2006.01)I;C12N5/08(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 深圳职业技术学院 |
| 发明(设计)人 | 金 刚;代建国 |
| 地址 | 518055广东省深圳市南山区西丽湖 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 深圳市维邦知识产权事务所 |
| 代理人 | 黄 莉 |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种从贴底生长的细胞系获得细胞克隆球的方法，其特征在于，其包括如下步骤： 步骤一、将细胞置于常规有血清培养基中进行常规培养，让细胞贴底生长； 步骤二、培养7～20天后，当悬浮的细胞中，完整的单个细胞达到一定数量时，收集悬浮细胞； 步骤三、将收集的悬浮细胞离心，弃去上清液，再用HBSS液清洗剩余物(含有具有较强增殖能力的单个细胞)； 步骤四、将清洗后的剩余物置于至少添加有生长因子的无血清培养基培养； 步骤五、培养10～20天后，即可获得直径在50～100微米的克隆球，克隆球部分呈悬浮状，部分为贴底生长，把悬浮的克隆球和贴底的克隆球及贴底细胞分开培养，并定期更换培养基以维持培养基中有效成分的含量，培养瓶中即会持续不断地生长出来新的克隆球。 |
| 摘要 | 本发明公开一种从贴底生长的细胞系获得细胞克隆球的方法，包括如下步骤：将细胞置于常规有血清培养基中进行常规培养，让细胞贴底生长；培养7～20天后，收集悬浮细胞；离心处理悬浮细胞，弃去上清液，再用HBSS液清洗剩余物；将清洗后的剩余物置于至少添加有生长因子的无血清培养基培养；培养10～20天后，即可获得克隆球，把悬浮的克隆球分离出来单独培养，贴底的克隆球和贴底细胞仍在一起培养，并定期更换培养基，即会持续不断地生长出新的克隆球。本发明方法简便，且不用消化酶，也不用机械方法制得单细胞悬液，可持续地获得遗传背景完全一致的干细胞克隆球；可广泛应用于干细胞理论研究、再生医学、新药开发等领域。 |
| 国际公布 |
