| 公开(公告)号 | CN1724677A |
| 公开(公告)日 | 2006.01.25 |
| 申请(专利)号 | CN200510084355.4 |
| 申请日期 | 2005.07.19 |
| 专利名称 | 一种体外培养骨骼肌表达体系 |
| 主分类号 | C12N15/85(2006.01)I |
| 分类号 | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 北京市肿瘤防治研究所 |
| 发明(设计)人 | 张志谦;宋 琳 |
| 地址 | 100034北京市西城区大红罗厂街1号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 北京中北商标专利事务所有限公司 |
| 代理人 | 吴 立 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种体外培养骨骼肌表达体系，主要包括含目的基因的表达载体的构建、表达载体转染宿主细胞群及筛选、目的基因在宿主细胞中的表达和表达产物的分离纯化、表达产物的活性检测的步骤，其特征在于所述的表达载体是在pcDNA3.0基础上，构建的带有myc10检测标签及6×his纯化标签的表达载体；且在所述的表达载体中插入人基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列(见序列1)。 |
| 摘要 | 本发明涉及了一种体外培养骨骼肌表达体系，包括含目的基因的表达载体的构建、表达载体转染宿主细胞群及筛选、目的基因在宿主细胞中的表达和表达产物的分离纯化等步骤，其特征在于所述的表达载体是在pcDNA3.0基础上，构建的带有myc10检测标签及6×his纯化标签的表达载体；且在所述的表达载体中插入人基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列。本发明在表达载体中插入了基质金属蛋白酶9(MMP-9)信号序列，增大了蛋白的分泌量；采用了QM7细胞作为宿主细胞表达蛋白，增大了蛋白的表达量；筛选出适合QM7细胞分化的无血清分化培养基，培养基造价低并且利于后期纯化工作，且为PEX作为重组蛋白药物进行大规模生产奠定了前期基础。 |
| 国际公布 |
