方法名称： |
儿茶—儿茶素和表儿茶素—HPLC-UV |
应用范围： |
用于儿茶中主要成分儿茶素及表儿茶素含量的测定 |
方法原理： |
本品用甲醇-水（1：1)超声提取，经液相色谱仪分离，在280nm测定，按外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 PE LC-200 高效液相色谱仪 LC295紫外可见检测器；HP3295 积分仪。 色谱条件 色谱柱：Phenomenex OD(2) 柱(5μm，4.6 mm×150 mm) ；流动相：0.04mol·L -1柠檬酸-N，N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃( 45∶8∶2 )；流速：0.8 mL·min-1 。柱温：35 ℃。检测波长：280 nm。进样量：5～10μL。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 精密称取儿茶素对照品16.07mg及表儿茶素对照品13.21mg，置25mL容量瓶中, 以甲醇-水(1∶1) 超声溶解并稀释至刻度， 摇匀，即得对照品溶液。 供试品溶液的制备 取儿茶样品2份，每份0.02 g，分别精密称定，置50mL容量瓶中，加甲醇-水(1∶1) 40mL超声20min溶解，并以甲醇-水(1∶1) 稀释至刻度，溶液过0.45μm 滤膜，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液5～10μL，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。按外标计算儿茶素和表儿茶素含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
王钢力，于建东，田金改等. 儿茶药材化学成分分析—反相高效液相色谱法测定儿茶中儿茶素和表儿茶素的含量. 药物分析杂志.1999，19（2)：88～90 |
