方法名称： |
何首乌—大黄素的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于定何首乌中大黄素含量的测定 |
方法原理： |
本品加硫酸回流提取后，再加氯仿提取，经液相色谱仪分离，在290nm处测定峰面积，以外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 美国Varian 公司Vista 56 型高效液相色谱仪；紫外检测器；Vista 401数据站。 色谱条件 色谱柱：美国Varian Micro Park Column MCH-10 (4.0mm×25cm)；流动相：甲醇-水(90∶10)；流速：0.6ml/m in； 柱温：30℃； 紫外检测波长：290nm。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 准确称取大黄素对照品1.48 mg， 置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，制成148mg/L的标准溶液，即得。 供试品溶液的制备 精密称取不同批次的何首乌粉末(过80目筛)0.2g， 加2.5mol/LH2SO430ml，回流4h，放冷过滤，滤液用氯仿(10.5ml)提取2 次，备用；滤渣用氯仿索氏提取至无色，合并氯仿液至100ml容量瓶中， 用氯仿稀释至刻度，摇匀，准确吸取20ml氯仿提取液，挥干，再用甲醇溶解，定容至2ml，即得供试品溶液。 |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液10μL，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。计算大黄素的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
葛秀允，代光秀等. 高效液相色谱法测定何首乌中大黄素的含量. 时珍国医国药.2002，13（12)：729 |
