止喘灵注射液—东莨菪碱的测定—高效液相色谱法 2

本方法采用高效液相色谱法测定止喘灵注射液中东莨菪碱的含量。

本方法适用于止喘灵注射液。

供试品于分液漏斗中，加氨试液调节至ph=9，氯仿提取，合并氯仿液，置温水浴回收氯仿至干，残渣加甲醇溶解并移容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经离心处理得样品溶液。取上清液注入液相色谱仪，检测东莨菪碱的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 氯仿

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Spherisorb-C₁₆柱（4.6mm×200mm,5um)。

1.3 蒸发光散射检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水=78 22

2.3柱温：25℃

2.4 气体流量：1.0mL/min

1. 称取供试品

精密量取本品15mL。

2. 对照品溶液的制备

精密称取氢溴酸东莨菪碱对照品15mg，置10mL容量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备。

3. 标准溶液的制备

精密量取氢溴酸东莨菪碱对照品贮备溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2，1 .4mL，分别置10mL容童瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置分液漏斗中，加氨试液调节至ph=9，氯仿提取3次(25, 20, 20 mL)，用合并氯仿液，置温水浴上回收氯仿至干，残渣加甲醇溶解并移至10mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，经离心处理(1200 r/min)10 min,即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线的绘制

精密吸取上述标准溶液20uL注入液相色谱仪，按上述色谱条件，测定氢溴酸东莨蓿碱溶液的响应值。以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液上清液20μL注入高效液相色谱仪，测定氢溴酸东莨蓿碱溶液的响应值，计算出其含量。

刘建华，杨德柱．HPLC法测定止喘灵注射液中东蓑著碱的含量．中国中医药信息杂志，2004，11（7)：609-610．