公开(公告)号 | CN1488761A |
公开(公告)日 | 2004.04.14 |
申请(专利)号 | CN03142232.2 |
申请日期 | 2003.08.13 |
专利名称 | 一类双链RNA分子及其在制备抑制乙型肝炎病毒复制药物中的应用 |
主分类号 | C12P19/34 |
分类号 | C12P19/34;C12N15/70;A61K31/7088;A61P1/16;A61P31/12 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 复旦大学;上海恒达科技发展股份有限公司 |
发明(设计)人 | 钱志康;宣宝琴;徐剑锋;李琳 |
地址 | 200433上海市邯郸路220号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海正旦专利代理有限公司 |
代理人 | 陆飞 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种利用大肠杆菌发酵制备用RNAi用ldsRNA和siRNA分子的方法,其特征在于包括构建ldsRNA表达载体,并转化大肠杆菌宿主菌,通过大规模发酵,用碱-SDS法抽提发酵菌体得到全RNA和质粒DNA的混合物;该混合物用CF-11柱进行纯化得到ldsRNA,并利用大肠杆菌RNase III将ldsRNA切成12-30bp的siRNA。 |
摘要 | 本发明属于分子生物学与生物医药技术领域,具体为一种利用大肠杆菌发酵制备RNA干扰用双链RNA分子或小干扰RNA分子的方法,并将这些RNA分子用于制备治疗乙型肝炎的药物。将本发明得到的ldsRNA或siRNA以适当的比例与乙型肝炎病毒表达载体混合,并用尾静脉液压法注射到小鼠体内。结果显示非同源性序列ldsRNA和siRNA基本不抑制乙型肝炎病毒在小鼠体内的复制,而与乙肝病毒基因同源性的ldsRNA和siRNA可以有效抑制乙型肝炎病毒在小鼠体内的感染复制,抑制率高达90%以上。 |
国际公布 |