| 公开(公告)号 | CN1147588C |
| 公开(公告)日 | 2004.04.28 |
| 申请(专利)号 | CN01131855.4 |
| 申请日期 | 2001.12.21 |
| 专利名称 | 一种高效表达生产肽抗生素的方法 |
| 主分类号 | C12P21/02 |
| 分类号 | C12P21/02;C12N15/11;C12N15/31;C12N15/63;C12N15/64 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 发明(设计)人 | 饶贤才;胡福泉 |
| 地址 | 400038 重庆市沙坪坝区高滩岩正街30号 |
| 颁证日 | 2004.04.28 |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 重庆;85 |
| 主权项 | 一种高效表达生产肽抗生素的方法，其具体步骤为：(a)设计一个承载蛋白(carrier protein)编码序列，具体序列为：ctcctatctaagagcctagaggatcatgaggcgggggtatgccctttgggctgcccctactgcttagctgactatgagagaatttggggtgtacgagtggtaagttctgtagctgcatctaatgataaggtagaggtggatcccaatggaatcaaagcaggagatccgggggctaagctcgataaggcaaggtggatgttggaatcatcttcgaagcgttcccgagagctctttatgcggtggcacaagttgctaacttcggagcaagcaaatatagtcgcgggggttggaggttcgtcgagaacggaatacagcgatatgatgctgccttcggacgacacctccttgagcgacacaagggtgaggttttggacccccaaagtagtttacccaccggtatcacgaagtttggaacgccctagcagccctagagctggtaatccaacaagaggagggttctaatggaacttctactggatccgagggc(489bp)；(b)将(a)所述的承载蛋白编码序列插入一表达载体，使该序列处于表达载体启动子的控制之下；(c)将(b)所述的构建了承载蛋白的表达载体转化微生物宿主细胞，筛选并鉴定阳性重组子；(d)克隆准备生产的肽抗生素(peptide antibiotics)编码基因；(e)将(d)所述的肽抗生素编码基因插入(c)所述的阳性重组子中，使肽抗生素位于承载蛋白的羧基端，其基因与承载蛋白编码序列融合成为一个融合基因；(f)将(e)所述的构建了融合基因的表达载体转化微生物宿主细胞，筛选并鉴定阳性细胞克隆；(g)培养(f)所述的阳性微生物细胞克隆并进行融合蛋白表达；(h)收集表达产物，纯化肽抗生素。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种利用DNA重组技术高效表达生产肽抗生素(Peptideantibiotics)的方法。还提供了一个可高效融合表达肽抗生素的承载蛋白(Carrierprotein)序列，通过构建承载蛋白与肽抗生素的融合蛋白表达载体，转化微生物宿主细胞，培养转化细胞克隆并进行融合蛋白表达，表达的融合蛋白可占微生物宿主细胞总蛋白的40～45％。 |
| 国际公布 |
