公开(公告)号 | CN1142277C |
公开(公告)日 | 2004.03.17 |
申请(专利)号 | CN97190542.8 |
申请日期 | 1997.05.15 |
专利名称 | 鉴定减毒水痘病毒Oka株的方法 |
主分类号 | C12N15/38 |
分类号 | C12N15/38;C12Q1/70;C12N7/00;C07K14/04;A61K39/25 |
分案原申请号 | |
优先权 | 1996.5.15 JP 158795/1996 |
申请(专利权)人 | 财团法人阪大微生物病研究会 |
发明(设计)人 | 森千里;高原理惠;纳寿一郎;五味康行 |
地址 | 日本大阪 |
颁证日 | 2004.03.17 |
国际申请 | PCT/JP97/01646 1997.5.15 |
进入国家日期 | 1998.01.14 |
专利代理机构 | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 |
代理人 | 郭建新 |
国省代码 | 日本;JP |
主权项 | 鉴定减毒水痘病毒Oka株的方法,它包括:分析样品水痘病毒的基因组DNA及其DNA片断;以及确定所述样品水痘病毒的分析过的基因组DNA及其DNA片断是否符合下列全部八个特征A1-A8:A1:用限制酶HpaI消化水痘病毒基因组DNA而获得的K片断的大小为3231bp;A2:用限制酶EcoRI消化水痘病毒基因组DNA而获得的P片断的大小为1749bp;A3:当用限制酶AccIII处理采用SEQ ID NO.3的PCR引物1和SEQ ID NO.5的PCR引物3、通过PCR由水痘病毒基因组DNA扩增的DNA片断时,该DNA片断被切割成大小分别为1208bp和556bp的两部分;A4:采用SEQ ID NO.4的PCR引物2和SEQ ID NO.5的PCR引物3、通过PCR由水痘病毒基因组DNA扩增的DNA片断的大小为487bp;A5:就一DNA片断而言,由PCR-SSCP测定的水痘病毒基因组DNA和减毒水痘病毒Oka株基因组DNA的电泳迁移率相同,其中,在所述PCR-SSCP的PCR中采用SEQ ID NO.4的PCR引物2和SEQ ID NO.5的PCR引物3;A6:采用SEQ ID NO.7的PCR引物PS1和SEQ ID NO.8的PCR引物PS2、通过PCR由水痘病毒基因组DNA扩增的DNA片断缺少限制酶PstI切割位点;A7:由水痘病毒基因组DNA编码、相应于SEQ ID NO.1的162氨基酸序列的162氨基酸序列与SEQ ID NO.1的162氨基酸序列之间的同源性为98-100%;和A8:由水痘病毒基因组DNA编码、相应于SEQ ID NO.2的560氨基酸序列的560氨基酸序列与SEQ ID NO.2的560氨基酸序列之间的同源性为99-100%。 |
摘要 | 公开了一种精确鉴定减毒水痘病毒Oka株的方法,该方法包括:分析Oka株和样品水痘株之间基因组DNA及其片断的差异,并且确定样品株是否符合下列全部8个特征:HpaI-K片断和EcoRI-P片断的大小;Gene14的R2-487区域的大小以及PCR-SSCP分析;用AccIII消化R2-1764片断而获得的限制片断的大小;PstI切割位点存在与否;由R2-487区域编码的氨基酸序列的同源性;由VZV Gene14的编码区编码的氨基酸序列的同源性。该方法可用于减毒水痘活疫苗的质量控制。还公开了可用于该方法的引物对。 |
国际公布 | WO97/43420 日 1997.11.20 |