公开(公告)号 | CN1513554A |
公开(公告)日 | 2004.07.21 |
申请(专利)号 | CN03111295.1 |
申请日期 | 2003.03.28 |
专利名称 | 动物狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗 |
主分类号 | A61K39/205 |
分类号 | A61K39/205;A61K39/00;A61P31/12;C12N15/47 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国人民解放军军需大学军事兽医研究所 |
发明(设计)人 | 扈荣良;张守峰;袁慧君 |
地址 | 130062吉林省长春市西安大路175号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 |
代理人 | 王薇 |
国省代码 | 吉林;22 |
主权项 | 一种动物狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗,是以狂犬病病毒SRV9克隆株糖蛋白和核蛋白cDNA经以下步骤分别构建出以pVAX1和pIRES为载体的基因疫苗;(1)、从克隆载体pTG中通过Pst I和Xba I酶切将糖蛋白cDNA克隆入经相同酶切的pVAXl中,构建重组疫苗pVG;(2)、从克隆载体pTN2中用HindIII和Sma I酶切将核蛋白cDNA克隆入经HindIII和EcoRV酶切的pVAXl中,构建重组疫苗pVN;(3)、从克隆载体pVG用EcoR I和Xba I酶切将糖蛋白cDNA克隆入经EcoRV酶切的pIRES中构建重组表达载体pIG;(4)、从克隆载体pTN2中用Hinc II和Xba I酶切将核蛋白cDNA克隆入经Sma I和Xba I酶切的pIG中构建重组疫苗pIGN;(5)、将上述DNA疫苗经碱裂解法制备后,800~4000μg/ml溶于生理盐水中,按糖蛋白:核蛋白按25-100μg:25-100μg/100μl比例混合。 |
摘要 | 本发明涉及一种动物狂犬病病毒糖/核蛋白“二价”DNA疫苗,是通过RT-PCR和克隆技术获得了狂犬病病毒SRV9克隆株糖蛋白cDNA和核蛋白cDNA,以上述糖蛋白和核蛋白cDNA为目的基因,分别制备了以pVAX1和pIRES为载体的基因疫苗。将两种基因疫苗联合(“二价”),以裸质粒形式或以司苯-甘油为佐剂形式免疫小鼠和犬3-4次后,免疫动物可产生良好的体液免疫和细胞免疫。该“二价”DNA疫苗无感染性,使用安全,免疫效果明确。是预防狂犬病的一种新型疫苗。 |
国际公布 |