公开(公告)号 | CN1169836C |
公开(公告)日 | 2004.10.06 |
申请(专利)号 | CN02115705.7 |
申请日期 | 2002.04.11 |
专利名称 | 液-固萃取体系分离纯化血红蛋白的方法 |
主分类号 | C07K14/805 |
分类号 | C07K14/805;C07K1/14 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中南民族大学 |
发明(设计)人 | 李步海;孙小梅;沈静茹;雷灼霖 |
地址 | 430074 湖北省武汉市民院路5号中南民族大学科研处 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 武汉开元专利代理有限责任公司 |
代理人 | 王和平 |
国省代码 | 湖北;42 |
主权项 | 一种液-固萃取体系分离纯化血红蛋白的方法,包括如下步骤:(1)、在具塞比色管中,加入硫酸铵或磷酸钾,pH控制在3.0~9.0,加入成相聚合物吐温80溶液和聚乙二醇(PEG)8000或聚乙二醇(PEG)6000与亚胺基二乙酸(IDA)组成的修饰物溶液,然后加入血样,用二次水定容,置于康氏电动震荡机上,平置振荡2-10分钟,取下倒置10-20分钟,体系分成聚合物固相和盐水液相,血红蛋白被萃入固相;(2)、在上述固相加二次水溶解后,加入乙二胺四乙酸和硫酸铵或磷酸钾,置于康氏电动震荡机上,平置振荡2-10分钟,取下倒置10-20分钟,体系分成聚合物固相和盐水液相,血红蛋白被反萃入液相;(3)、将上述萃入液相的血红蛋白置于透析袋中进行透析,小分子的盐、少量聚合物可以通过透析袋,而留在透析袋中血红蛋白大分子,其纯度可达到99%以上。 |
摘要 | 本发明涉及一种用液-固萃取体系从血液中分离纯化血红蛋白的方法。本发明方法所需设备简单,分离纯化成本低,速度快,成相容易,成相后直接倾出液相即可使液固两相分离,无须双水相萃取中的离心等操作,不用有机溶剂,无毒性,成相聚合物及盐对蛋白质有稳定和保护作用。萃取分离选择性好,萃取容量大,是易于规模放大分离纯化血红蛋白的新技术。本发明用PEG修饰物混合聚合物-盐-水液-固萃取体系对猪血、牛血、人血中血红蛋白进行萃取,经过一次萃取,一次反萃和透析即可得到纯度大于99%的血红蛋白的水溶液。 |
国际公布 |