| 公开(公告)号 | CN1200097C |
| 公开(公告)日 | 2005.05.04 |
| 申请(专利)号 | CN00127953.X |
| 申请日期 | 2000.12.19 |
| 专利名称 | 重组人表皮生长因子、其制备方法和药物组合物 |
| 主分类号 | C12N1/20 |
| 分类号 | C12N1/20;C12N15/63 |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国科学院上海生物化学研究所 |
| 发明(设计)人 | 甘人宝;李载平;钱悦;黄培勇 |
| 地址 | 200031 上海市岳阳路320号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海专利商标事务所有限公司 |
| 代理人 | 章鸣玉 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 重组人表皮生长因子的制备方法，包括以下步骤：用大肠杆菌偏爱的密码子构建和克隆合成的hEGF基因；构建和克隆碱性磷酸酯酶启动基因和信号肽序列基因片段phoA-P+sig；构建表达质粒pAE-8；用表达质粒pAE-8转化宿主菌并筛选得到工程菌株EE-8；将工程菌EE-8在控制无机磷含量的Lpi培养基中或中试规模的培养基中培养，诱导表达rhEGF；其中所述控制无机磷含量的Lpi培养基的配方如下：每50ml液体培养基中含：氨苄青霉素钠最终浓度为100μg/mlPolypepton0.5g酵母提取物0.05g1MTrisCl，pH7.2，2.5ml葡萄糖0.5gMgSO47H2O0.05g饱和酚红100μl；所述中试规模的发酵培养基的配方如下：Polypepton2％、酵母提取物1％、无水硫酸镁0.05％、无水葡萄糖3％及Na2HPO4·12H2O0.06％，NaH2PO4·2H2O0.04％重量/体积。 |
| 摘要 | 本发明提供工程菌株EE-8和用其制备重组人表皮生长因子的方法，包括：用大肠杆菌偏爱的密码子构建和克隆合成的hEGF基因；构建和克隆碱性磷酸酯酶启动基因和信号肽序列基因片段phoA-P+sig；构建表达质粒pAE-8；用表达质粒pAE-8转化宿主菌并筛选得到工程菌株EE-8；和将工程菌EE-8在控制无机磷含量的Lpi培养基中培养，诱导表达rhEGF。该方法能高效、稳定地分泌表达rhEGF。本发明还提供治疗消化道溃疡用的rhEGF药物组合物，能在胃内缓慢持续释放药物，发挥持久疗效。 |
| 国际公布 |
