公开(公告)号 | CN1233816C |
公开(公告)日 | 2005.12.28 |
申请(专利)号 | CN02108973.6 |
申请日期 | 2002.04.16 |
专利名称 | 酵母重组株及IFNα-la干扰素的纯化方法 |
主分类号 | C12N1/19 |
分类号 | C12N1/19;C12N15/20;C12N15/81;C12N15/21;C07K14/56;C07K1/14 |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 海南海梁生物高科技有限公司 |
发明(设计)人 | 梁国栋;周 鹏;夏中宁 |
地址 | 570216海南省海口市金盘工业区金盘路17号嘉海大厦三楼 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | |
代理人 | |
国省代码 | 海南;66 |
主权项 | 一种酵母重组株,其特征在于将去除了启始密码子ATG的人α-1a干扰素基因插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游xhoI/xbaI位点,同时删除载体Kex2位点之后的四个氨基酸Glu-Ala-Glu-Ala,构建成人α-1a干扰素基因分泌型表达载体rhIFNα-1a/pGAPZα-A,转入毕赤氏酵母Pichiapastoris的菌珠GS115,构建成分泌型人α-1a干扰素的酵母重组株rhIFNα-1a/pGAPZα-A/GS115。 |
摘要 | 本发明涉及分泌表达α-1a干扰素的酵母工程菌株IFNα-1a/pGAPZα-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产α-1a干扰素的纯化方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统,目标蛋白α-1a干扰素不需要复性,其生物比活性可达到1.0×109单位/毫克蛋白,低毒副作用;在纯化过程中,不需要价值昂贵的单抗柱,即可从发酵液中提取获得纯度达95%以上的目标蛋白α-1a干扰素,降低了生产成本。 |
国际公布 |