公开(公告)号 | CN1255547C |
公开(公告)日 | 2006.05.10 |
申请(专利)号 | CN200410005408.4 |
申请日期 | 2004.02.18 |
专利名称 | 酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺 |
主分类号 | C12P21/00(2006.01)I |
分类号 | C12P21/00(2006.01)I;C12R1/85(2006.01)N |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 北京天坛生物制品股份有限公司;天津博荟生物技术有限公司 |
发明(设计)人 | 汪和睦;马民强;李 津;杨云凯 |
地址 | 100024中国北京市朝阳区三间房南里4号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 中原信达知识产权代理有限责任公司 |
代理人 | 丁业平;王维玉 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法,其中所述的啤酒酵母工程菌的受体菌是亮氨酸营养缺陷型的;所述的啤酒酵母工程菌包含重组2μ质粒但不含天然的2μ质粒;所述重组2μ质粒包含编码乙肝表面抗原的基因,该基因的5’端和3’端分别与3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子和乙醇脱氢酶I终止子可操作连接;所述重组2μ质粒还包含编码亮氨酸的基因,该基因的5’端和3’端分别与启动子和终止子可操作连接;该方法包括如下步骤: 1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤; 2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤;和 3)从步骤2)所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤; 该方法的特征在于,在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源;将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。 |
摘要 | 本发明公开了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法,该方法包括如下步骤:1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤;2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤;和3)从步骤2所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤;该方法的特征在于,在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源;将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。 |
国际公布 |