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表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的酵母重组株及rhGM-CSF的纯化方法

公开(公告)号 CN1268751C  
公开(公告)日 2006.08.09  
申请(专利)号 CN03137202.3  
申请日期 2003.05.26  
专利名称 表达人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的酵母重组株及rhGM-CSF的纯化方法  
主分类号 C12N15/63(2006.01)I  
分类号 C12N15/63(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/27(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/535(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 海南国栋药物研究所有限公司  
发明(设计)人 梁国栋;周 鹏;夏中宁;蒲广西;陈海宁  
地址 570216海南省海口市金盘工业区金盘路17号嘉海大厦三楼  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 海南;66  
主权项 一种表达重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的分泌型表达载体,其特征在于,该载体含有:重组的rhGM-CSF序列,其被插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游位点Xhoi/Xbai,同时删除Kex2位点之后的Glu-Ala-Glu-Ala编码序列和启始密码子ATG,构建成rhGM-CSF分泌型表达载体。  
摘要 本发明公开了一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的分泌型表达载体和一种简易纯化方法,用该分泌型表达载体转化的宿主细胞,以及用上述表达载体的毕赤氏酵母重组工程菌株发酵表达rhGM-CSF的方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统,目标蛋白rhGM-CSF不需要复性,其生物比活性可达到3.4×107单位/毫克蛋白,低毒副作用;因此,本发明的方法制得的rhGM-CSF不仅产率高,而且纯化工艺简便、成本低、产品毒副作用低。  
国际公布  
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