公开(公告)号
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CN1789424A
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公开(公告)日
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2006.06.21
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申请(专利)号
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CN200510100750.7
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申请日期
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2005.11.01
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专利名称
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双重靶效应基因嵌合重组体及其构建方法和应用
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主分类号
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C12N15/62(2006.01)I
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分类号
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C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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暨南大学
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发明(设计)人
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蔡绍晖;杜 军;谭 毅;蔡绍皙;马伟峰;陈宏远;郭自刚
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地址
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510632广东省广州市天河区黄埔大道西601号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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广州市华学知识产权代理有限公司
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代理人
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陈燕娴
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种双重靶效应基因嵌合重组体,其特征在于,所述双重靶效应基因嵌合重组体核酸编码序列为: aagcccgtcagcctgagctacagatgcccatgccgattcttcgaaagccatgttgccagagccaacgtcaagcatctcaa aattctcaacactccaaactgtgcccttcagattgtagcccggctgaagaacaacaacagacaagtgtgcattgacccgaa gctcgagCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAggatcc gatgaggcttctgggataggcccagaagttcctgatgaccgcgacttcgagccctccctaggcccagtgtgccccttccg ctgtcaatgccatcttcgagtggtccagtgttctgatttgggtctggacaaagtgccaaaggatcttccccctgacacaactct gctagacctgcaaaacaacaaaataaccgaaatcaaagatggagactttaagaacctgaagaaccttcacgcattgattctt gtcaacaataaaattagcaaagttagtcctggagcatttacacctttggtgaagttggaacgactttatctgtccaagaatcag ctgaaggaattgccagaaaaaatgcccaaaactcttcaggagctgcgtgcccatgagaatgagatcaccaaagtgcgaa aagttactttcaatggactgaaccagatgattgtcatagaactgggcaccaatccgctgaagagctcaggaattgaaaatgg ggctttccagggaatgaagaagctctcctacatccgcattgctgataccaatatcaccagcattcctcaaggtcttcctccttc ccttacggaattacatcttgatggcaacaaaatcagcagagttgatgcagctagcctgaaaggactgaataatttggctaag ttgggattgagtttcaacagcatctctgctgttgacaatggctctctggccaacacgcctcatctgagggagcttcacttgga caacaacaagcttaccagagtacctggtgggctggcagagcataagtacatccaggttgtctaccttcataacaacaatatc tctgtagttggatcaagtgacttctgcccacctggacacaacaccaaaaaggcttcttattcgggtgtgagtcttttcagcaac ccggtccagtactgggagatacagccatccaccttcagatgtgtctacgtgcgctctgccattcaactcggaaactataag; 所述双重靶效应基因嵌合重组体氨基酸序列为: LysProValSerLeuSerTyrArgCysProCysArgPhePheGluSer HisValAlaArgAlaAsnValLysHisLeuLysIleLeuAsnThrPro AsnCysAlaLeuGlnIleValAlaArgLeuLysAsnAsnAsnArgGln ValCysIleAspProLysLeuGluProLysSerCysAspLysThrHis ThrCysProProCysProGlySerAspGluAlaSerGlyIleGlyPro GluValProAspAspArgAspPheGluProSerLeuGlyProValCys ProPheArgCysGlnCysHisLeuArgValValGlnCysSerAspLeu GlyLeuAspLysValProLysAspLeuProProAspThrThrLeuLeu AspLeuGlnAsnAsnLysIleThrGluIleLysAspGlyAspPheLys AsnLeuLysAsnLeuHisAlaLeuIleLeuValAsnAsnLysIleSer LysValSerProGlyAlaPheThrProLeuValLysLeuGluArgLeu IyrLeuSerLysAsnGlnLeuLysGluLeuProGluLysMetProLys ThrLeuGlnGluLeuArgAlaHisGluAsnGluIleThrLysValArg LysValThrPheAsnGlyLeuAsnGlnMetIleValIleGluLeuGly ThrAsnProLeuLysSerSerGlyIleGluAsnGlyAlaPheGlnGly MetLysLysLeuSerTyrIleArgIleAlaAspThrAsnIleThrSer IleProGlnGlyLeuProProSerLeuThrGluLeuHisLeuAspGly AsnLysIleSerArgValAspAlaAlaSerLeuLysGlyLeuAsnAsn LeuAlaLysLeuGlyLeuSerPheAsnSerIleSerAlaValAspAsn GlySerLeuAlaAsnThrProHisLeuArgGluLeuHisLeuAspAsn AsnLysLeuThrArgValProGlyGlyLeuAlaGluHisLysTyrIle GlnValValTyrLeuHisAsnAsnAsnIleSerValValGlySerSer AspPheCysProProGlyHisAsnThrLysLysAlaSerTyrSerGly ValSerLeuPheSerAsnProValGlnTyrTrpGluIleGlnProSer ThrPheArgCysValTyrValArgSerAlaIleGlnLeuGlyAsnTyr Lys。
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摘要
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本发明提供了一种双重靶效应基因嵌合重组体及其构建方法和应用。用特异性引物以SDF-54/R/pET-30a(+)为模板扩增SDF-54/R,并将其直接插入T-A克隆载体pMD18-T,然后在其3’-端顺次加入人类IgG1抗体重链的铰链区编码序列和Decorin成熟肽编码序列,构建成SDF-54/R-IgG1HCHR-Decorin/pMD18-T嵌合重组体。SDF-54/R-IgG1HCHR-Decorin保留对CXCR4的亲和力而失去其内在活性,并能抑制野生型SDF-1α对乳腺癌细胞的趋化迁移活性、抑制乳腺癌细胞的生长,其可作为CXCR4的新型拮抗剂—同时抑制CXCR4阳性肿瘤细胞的生长和转移,具有双重靶效应。
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国际公布
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