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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:一种利用大肠杆菌生产人α防御素1蛋白的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

一种利用大肠杆菌生产人α防御素1蛋白的方法

公开(公告)号 CN1810954A  
公开(公告)日 2006.08.02  
申请(专利)号 CN200510112983.9  
申请日期 2005.10.18  
专利名称 一种利用大肠杆菌生产人α防御素1蛋白的方法  
主分类号 C12N1/21(2006.01)I  
分类号 C12N1/21(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 甘肃亚盛盐化工业集团有限责任公司  
发明(设计)人 周长生;陈其新;李春丽;陈正华  
地址 730030甘肃省兰州市城关区张掖路219号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 甘肃省专利服务中心  
代理人 田玉兰;程 萍  
国省代码 甘肃;62  
主权项 一种利用大肠杆菌生产人α防御素1蛋白的方法,包括以下步骤: (1)使用SEQIDNO1所示的序列片段 1ATGGCCTGCTATTGCCGTATTCCAGCCTGC 31ATTGCAGGCGAACGTCGTTATGGCACCTGC 61ATCTACCAGGGCCGTCTCTGGGCATTCTGC 91TGCTGATAAG 下划线为起始密码子或双终止密码子及侧翼序列 (2)将上述基因序列插入T7型Trx融合表达载体中,获得重组质粒pET32a-mHNP1。 (3)将pET32a-mHNP1导入匹配大肠杆菌中组成完整表达体系; (4)用异丙基硫代-β-D半乳糖糖苷诱导上述体系在菌体内表达人HNP1成熟蛋白。  
摘要 本发明提供了一种利用大肠杆菌生产生物活性物质人α防御素1蛋白的方法及其适用的优化设计DNA序列和重组表达质粒。包括:使用由人α防御素1成熟肽编码序列优化设计后获得的序列SEQ ID NO:1,构建成原核表达载体质粒pET32a-mHNP1,将质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,化学诱导表达人α-防御素1。本法可克服因α防御素1蛋白对宿主菌本身的毒害作用而引起的低表达甚至不表达,大量生产有活性的人α防御素1蛋白,满足有关结构、生化性质研究及抗体制备等方面的需要,也可应用于医药卫生领域。  
国际公布  
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