公开(公告)号 | CN1810959A |
公开(公告)日 | 2006.08.02 |
申请(专利)号 | CN200610033007.9 |
申请日期 | 2006.01.13 |
专利名称 | 人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物 |
主分类号 | C12N5/08(2006.01)I |
分类号 | C12N5/08(2006.01)I;A61K35/50(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 深圳市北科生物科技有限公司 |
发明(设计)人 | 胡 祥;杨 波 |
地址 | 518057广东省深圳市南山区科技园深港产学研基地大楼西座W400座 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 深圳市中知专利商标代理有限公司 |
代理人 | 宋湘红 |
国省代码 | 广东;44 |
主权项 | 一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法,其特征在于包括如下顺序的步骤: (1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化,然后用胶原酶、脱氧核糖核酸酶消化,得到细胞悬液; (2)将上一步所得的细胞悬液过滤,制成单细胞悬液; (3)将第(2)步所得细胞接种于培养基中,置于37℃、饱和湿度、体积分数为5%的CO2培养箱中进行培养,并通过换液和传代,使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化,所述培养基采用VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培养基,其中含有体积百分含量为10%-20%的胎牛血清和终浓度为10-20ng/ml的碱性成纤维生长因子。 |
摘要 | 本发明为一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物,分离及培养方法是将人羊膜用胰蛋白酶、胶原酶、脱氧核糖核酸酶相继消化,然后过滤制成单细胞悬液,再采用加有体积百分含量为10%-20%的胎牛血清和终浓度为10-20ng/ml的碱性成纤维生长因子的VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培养基,置于37℃、饱和湿度、体积分数为5%的CO2培养箱中进行培养,通过换液和传代,使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化。本发明方法具有来源广泛,不受伦理限制等优越性,具有广阔的应用前景,本发明的医用组合物可用于神经替代治疗、用于心肌梗塞的治疗、用于糖尿病的治疗、用于骨组织工程、应用于整形外科等。 |
国际公布 |