公开(公告)号 | CN1814778A |
公开(公告)日 | 2006.08.09 |
申请(专利)号 | CN200510022190.8 |
申请日期 | 2005.12.02 |
专利名称 | 一种医用胶原蛋白粉剂的制备方法 |
主分类号 | C12P21/02(2006.01)I |
分类号 | C12P21/02(2006.01)I;A61L15/32(2006.01)I;A61L31/04(2006.01)I;A61L33/12(2006.01)I;A61K47/42(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 成都佰乐金生物科技有限公司 |
发明(设计)人 | 但卫华;曾 睿;林 海;但年华;米贞健 |
地址 | 610065四川省成都市高新区高朋大道5号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 成都科海专利事务有限责任公司 |
代理人 | 邓继轩 |
国省代码 | 四川;51 |
主权项 | 医用胶原蛋白粉的制备方法,其特征在于该制备方法含有以下步骤: (1)预处理:取纯化猪皮100重量份,放入转鼓中,加入温度为32-40℃的去离子水300-600重量份,氯化钠3-10重量份,转动20-150min;控干废液,加入温度为32-40℃的去离子水300-600重量份,平平加1-5重量份,转动20-150min;控干废液,加入去离子水300-600重量份,转动30-40min;控干废液,加入去离子水300-600重量份,转动30-40min; (2)分割:从转鼓中取出预处理过的皮坯,离心机脱水,然后分割成2-6×2-6cm的小块; (3)冻干:将小皮块放入冻干机中,降温参数定为下降2℃/min,直至冷阱温度降至-34℃,抽真空至45-150mbar保持24h,然后缓慢升温8-15h,使冷阱温度升至15-30℃,完成冻干过程; (4)粉碎:在碎皮机上将小皮块粉碎成小皮粒,其粒度要求为:0.5-1.0×0.5-1.0mm; (5)浸酸:取100重量份的干燥小皮粒放于转鼓中,加入1000-5000重量份的三羟甲基氨基甲烷-盐酸盐,pH为7.4的缓冲液,用冰块调节鼓内温度达到4-15℃,间歇转动,转动3min/30min×2-9次,然后连续转动10min,再间歇转动,转动3min/30min×1-6次,静置30min,用耐酸真空泵吸出转鼓中上层清液,再向转鼓中加入HAc,调节pH=1.8-2.8,转鼓内温度为4-15℃,静置浸泡1-4h; (6)酶消化:调节并保持转鼓内温度达到4-15℃,加入0.5-4.0重量份的复合酶皮胶原处理剂E,连续转动4-12h; (7)一次盐析:用耐酸真空泵将酶消化液泵入离心机中进行离心分离,并用耐酸真空泵将上清液泵入转鼓中,用NaOH溶液调整清液的pH值至7.2-8.2,转动中,缓慢加入(NH4)2SO4,使其浓度达到0.8-1.8mol/L,静置6-14h; (8)酸溶解:用耐酸真空泵将盐析液泵入离心机中进行离心分离,取离心机中的沉淀物,弃上清液,并将离心机中的沉淀物移入转鼓中的事先已经配制好的0.1-1.2MHAc溶液中,转动10-40min,获得粗制胶原蛋白溶液; (9)二次盐析:将粗制胶原蛋白溶液用酸调节pH为1.8-2.8,在离心机中离心分离,用耐酸真空泵将此清液泵入另一转鼓中,转动中,向转鼓中的清液中缓慢加入(NH4)2SO4,使其浓度达到0.8-1.8mol/L,然后,用NaOH溶液调整清液的pH值至6.8-7.4,静置8-18h; (10)酸溶解:用耐酸真空泵泵出上清液,弃之,留取沉淀物;转动中,从转鼓轴孔缓慢加入0.2-0.8MHAc溶液100-300重量份,转动10-40min; (11)分级:将所得到的胶原蛋白溶液用去离子水稀释1-5倍,通过0.2μm的微孔滤膜除去微粒,然后采用凝胶过滤色层分离法进行分级; (12)透析:分别将不同级分的胶原蛋白溶液倒入36mm透析袋,透析分子量10kD,先对0.04mol/L和0.02mol/L的磷酸二氢钾或磷酸二氢钠溶液透析2天,再对蒸馏水透析3天; (13)喷雾干燥:分别将不同级分的胶原蛋白溶液用0.2-0.8MHAc溶液溶解成浓度小于0.5wt%的稀溶液,在温度低于60℃的条件下喷雾干燥,称重包装后密封干燥保存。 |
摘要 | 本发明公开了一种医用胶原蛋白粉的制备方法,其特点是采用纯化猪皮为原料,经预处理、分割、冻干、粉碎、浸酸,在温度为4-15℃,用0.5-4.0wt%的复合酶皮胶原处理剂E消化4-12h,得到胶原蛋白的粗制品,再经精制、分级、干燥,获得高纯度的医用胶原蛋白粉剂。这种医用胶原蛋白粉剂用于制备敷料膜、止血海绵、组织工程支架材料、药物缓释载体和医用纤维。 |
国际公布 |