方法名称： |
西藏红豆杉—紫杉醇的测定—HPLC-UV |
应用范围： |
用于西藏红豆杉中紫杉醇含量的测定 |
方法原理： |
本品细粉用甲醇超声提取，经液相色谱仪分离，在227nm测定，外标法计算紫杉醇的含量 |
仪器设备及实验条件： |
仪器设备 Agilentl100高效液相色谱仪；DAD检测器；Agilentl100工作站。 色谱条件 色谱柱：Kromasil-C18 (250mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇-水（65 ：35 )；流速：0.8mL·min-1 ；检测波长：227nm；柱温：35℃。 |
试样制备： |
对照品溶液制备 准确称取对照品紫杉醇1.0mg，置于1.0mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容，配制成相应浓度的对照品储备液，将对照品储备液稀释100倍，即得对照品溶液（浓度为0.01mg/ml)。 供试品溶液的制备 准确称取粉碎至80目的样品5g，加入甲20mL，超声提取1h，抽滤，以甲醇洗涤滤渣2次，每次1mL. 滤渣重复上述操作，所得滤液与前一次滤液合并，回收大部分溶剂后，与2g中性氧化铝吸附混合，干燥1小时装入预先装填好的中性氧化铝(10g)小柱上，用氯仿100%淋洗至流出液无色，然后用三氯甲烷-甲醇(100 ：5) 洗脱至绿色带至柱底层止，温水浴挥干，残渣用甲醇溶解并定容至2mL，即得供试品溶液. |
操作步骤： |
精密吸取对照液以及供试品溶液1Oμl，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。计算含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
吴江，卢永昌，朱小. 固相萃取—反相高效液相色谱法测定西藏红豆杉叶中紫杉醇的含量. 青海师范大学学报(自然科学版).2006，3：71～73 |
