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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:西藏红豆杉—紫杉醇的测定方法—HPLC-DAD中药质量控制方法/操作步骤
    

西藏红豆杉—紫杉醇的测定方法—HPLC-DAD

  
方法名称:
  西藏红豆杉—紫杉醇的测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于西藏红豆杉中紫杉醇含量的测定
方法原理:
 本品细粉用甲醇超声提取,经液相色谱仪分离,在230nm测定,外标法计算紫杉醇的含量
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Agilentl100高效液相色谱仪;DAD 检测器。

色谱条件  色谱柱:phenomenexluna C18 柱( 250×4.60mm,5um) ;柱温:30℃;流动相:甲醇-水( 60 :40);流速:1ml/ min;检测波长:230nm;进样量:10µl。

试样制备:
 

对照品溶液制备  精密称取紫杉醇标准品1.00mg,定容于1ml 甲醇中,稀释得0. 100mg·ml-1浓度的甲醇溶液,作为对照品贮备液。

供试品溶液的制备  取红豆杉各部位(大树皮、枝树皮、果、叶),真空干燥后粉碎,过100目筛,置于密封容器中保存精密称取样品2.0g,置于圆底烧瓶中,加入甲醇20ml,置于超声清洗器中于50℃超声振荡提取60分钟,甲醇液过滤,滤渣和滤纸复加20ml 甲醇,在相同条件下超声提取40分钟,再次过滤后,滤渣和滤纸再加20ml甲醇,在相同条件下超声提取20分钟. 合并滤液,减压蒸干后,残渣加30ml氯仿,超声振荡30分钟,过滤,取氯仿层,回收氯仿,于残渣中加少许甲醇,超声萃取,甲醇液离心,上层清液以甲醇定容至1ml.叶提取物经自制化铝柱,用氯仿洗脱非极性成分后,甲醇洗脱,浓缩,以甲醇定容至1ml.定容后的甲醇液经0.45μl滤膜过滤,即得供试品溶液。

操作步骤:
  精密吸取对照液以及供试品溶液1Oμl,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积。计算含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  林鹏程,高东红,孝贤等. 西藏红豆杉不同部位紫杉醇含量的分布研究. 青海师专学报(教育科学).2003,(6):87~88
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