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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中药及天然药物质量控制研究方法 >> 正文:蜂蜜—咖啡因的含量测定方法—HPLC-DAD中药质量控制方法/操作步骤
    

蜂蜜—咖啡因的含量测定方法—HPLC-DAD

  
方法名称:
  蜂蜜咖啡因的含量测定—HPLC-DAD
应用范围:
  用于蜂蜜中咖啡因含量的测定。
方法原理:
 本品加入50g/LNaOH水溶液和氯仿中,离心,有机相经液相色谱仪分离,在273nm测定,按外标法计算含量。
仪器设备及实验条件:
 

仪器设备  Shimadzu LC-10AT高效液相色谱仪;Shimadzu SPD-M10AVP二极管阵列检测器;Shimadzu CBM-10A色谱数据采集站;Shimadzu CLASS -LC10色谱工作站,

色谱条件  色谱柱:SUPELCO Discovery RP-Amide C16 柱(25cm×4.6mm ID,5μm) ;柱温:40℃;流动相:乙腈-水-乙酸(体积比16∶83∶1),流速:0.5mL/min;检测波长:273nm;
试样制备:
 

对照品溶液的制备  咖啡因对照品用水配成1.000g/L标准储备液,再根据检测需要稀释成相应含量的标准工作液

供试品溶液的制备  准确称取25g(准确至0. 01g)均匀试样于50mL离心管中,对含量高的样品适当减少称样量,加入10mL50g/LNaOH水溶液,混匀,然后定量加入20.0mL氯仿,混匀5min,于2000r/min 离心,将上层水相用尖嘴吸管弃去,有机相再分别用5mL 50g/ LNaOH洗涤2 次,弃去水相,有机相再混合均匀后,过滤,定量吸取滤液10.0 mL,于45℃微量化样品处理仪上空气流下吹干,定量加入2.0mL 水,溶解残渣,混匀,0.45μm微孔滤膜过滤后,待测。
操作步骤:
  精密吸咖啡因对照液以及蜂蜜样品溶液20μL,,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定峰面积,以外标法计算蜂蜜中咖啡因的含量。
附件:
  点击下载 (解压密码:www.med126.com)
备注:
 
参考文献:
  熊芳,李拥军,戴华. 蜂蜜中咖啡因含量的液相色谱法测定. 分析测试学报.2002.9.21(5):97~99
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