疏风定痛丸－士的宁的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定疏风定痛丸中士的宁的含量。

本方法适用于中成药舒风定痛丸。

供试品用三氯甲烷提取，经处理后进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长260nm处检测士的宁的峰面积，计算出其含量。

1 三氯甲烷

2 乙腈

3 0.01mol/L庚烷磺酸钠

4 0.02mol/L磷酸二氢钾

5 10%磷酸

6 甲醇

7 氢氧化钠试液

8 1%硫酸溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

硅胶为填充剂，理论塔板数按士的宁峰计应不低于5000。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值为2.8)=21 79

2.2 检测波长：260nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取重量差异项下的本品，剪碎，混匀，取约5g，精密称定，作为供试品。

2.对照品溶液的制备

精密称取士的宁对照品6mg，置10mL量瓶中，加三氯甲烷使溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取2mL，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含士的宁0.12mg的溶液。

3.供试品溶液的制备

供试品置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液3mL，混匀，放置30分钟，精密加入三氯甲烷25mL，密塞，称定重量，置水浴中加热回流2小时，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，通过铺有少量无水硫酸钠的滤纸滤过，精密量取续滤液10 mL，置分液漏斗中，用1%硫酸溶液振摇提取5次（15mL、15mL、10mL、10mL、10mL)，合并酸液，用30%氢氧化钠溶液调节pH值为10～11，用三氯甲烷振摇提取5次（20mL、20mL、15mL、15mL、15mL)，合并三氯甲烷提取液，回收三氯甲烷至干，残渣加甲醇适量使溶解，并转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长260nm处测定士的宁（C₂₁H₂₂N₂O₂)的峰面积，计算出其含量。