方法名称: |
灯盏细心(灯盏花)-野黄芩苷的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定灯盏细心中野黄芩苷的含量。 本方法适用于菊科植物短葶飞蓬Erigeron breviscapus(Vant.) Hand.-Mazz的干燥全草。 |
方法原理: |
本品加三氯甲烷于索氏提取器中提取,药渣加甲醇加热回流,取续滤液蒸干,残渣加甲醇溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长335nm处检测野黄芩苷的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2. 0.1%磷酸溶液 3. 三氯甲烷 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按野黄芩苷峰计算应不低于5000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 0.1%磷酸溶液=40 60 2.2检测波长:335nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称定本品粉末0.5g,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取野黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 取本品粗粉约0.5g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷适量,加热回流至提取液无绿色,弃去三氯甲烷液,药渣挥去溶剂,连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,称定重量,放置1小时,水浴中加热回流1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液25mL,回收溶剂至干,残渣用甲醇溶解并转移至10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5~10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长335nm处测定野黄芩苷(C21H18O12)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p100。 |