莪术油－牻牛儿酮的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定莪术油中牻牛儿酮的含量。

本方法适用于莪术（温莪术)经水蒸气蒸馏提取的挥发油。

本品加乙醇溶解后量取一定量加流动相定容，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长210nm处检测牻牛儿酮的吸收值，计算出其含量。

1. 乙醇

2. 乙腈

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

氰基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按牻牛儿酮峰计算应不低于5000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 水 ＝35 65

2.2检测波长：210nm

2.3柱温：35℃

1.称取供试品

精密称定本品0.1g，为供试品。

2.对照品溶液的制备

取牻牛儿酮对照品20mg，精密称定，置50 mL量瓶中，用乙醇溶解，并稀释至刻度，摇匀，精密量取2 mL，置50 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，制成每1mL含牻牛儿酮16mg的溶液。

3.供试品溶液的制备

取本品约0.1g，精密称定，置50 mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取2 mL，置25 mL量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长210nm处测定牻牛儿酮（C₁₄H₂₂O)的峰面积，计算出其含量。