消银片—苦参碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定消银片中苦参碱(C₁₅H₂₄N₂O)的含量。

本方法适用于中成药消银片。

将供试品加氯仿氨水提取，过滤，滤液挥干，加乙腈和磷酸溶液稀释定容，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，检测苦参碱(C₁₅H₂₄N₂O)的含量。

1. 乙腈（色谱纯)

2 .0.1%磷酸溶液

3 .三乙胺

4 .氯仿

5 .氨水

1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2色谱柱

Hypersil ODS柱 (250 × 4.6mm，5µm)，理论板数按苦参碱计算应不低于2000。

1.3紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 0.1%磷酸溶液 = 40 60

2.2 检测波长：220nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取消银片20片，剥去糖衣后，称重，研细。精密称取本品粉末适量。

2.对照品溶液的制备

取苦参碱对照品约20mg，精密称定，置50mL量瓶中，加流动相适量溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密称取苦参碱对照品约10mg，置50mL量瓶中，加流动相适量至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

3. 标准溶液的制备

精密量取对照品储备液1、3、5、7、9mL分别置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品分别加入30mL氯仿及氨水1mL，振摇，放置过夜，滤过，分用20mL氯仿分三次洗涤容器及残渣，洗液与滤液合并，挥干，加流动相适量溶解，转移至25mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 标准曲线的绘制

精密吸取上述标准溶液10µL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长220nm处测定苦参碱的吸收值，以对照品溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长220nm处测定苦参碱的吸收值，计算其含量。

刘宇，吴玉山，陈晓伟等. 高效液相色谱法测定苦参碱含量.黑龙江医药. 2003，16(5)：429-430.